Identificación de MicroARNs como biomarcadores de gravedad y respuesta al tratamiento en pacientes con psoriasis

Resumen

Los microARNs se han relacionado con la psoriasis desde hace poco más de una década. Sin embargo, estamos lejos de una comprensión completa de su papel durante el desarrollo de esta enfermedad, al igual que ocurre con otras enfermedades inflamatorias mediadas por la respuesta inmune (IMIDs). La posibilidad de que determinados perfiles de microARNs, ya sea en piel o circulantes, puedan utilizarse como biomarcadores de riesgo de desarrollo, de gravedad o de respuesta a tratamiento ha alimentado el interés creciente en estas moléculas. Nuestro objetivo en este trabajo fue, en primer lugar, el de caracterizar la expresión cutánea de microARNs no descritos previamente en psoriasis, los cambios inducidos en esta expresión tras el tratamiento con biológicos y su asociación con la mejoría de la enfermedad. Para ello, en una primera fase realizamos técnicas de secuenciación masiva (NGS) a partir de cinco muestras de piel de pacientes con psoriasis (piel lesional y no lesional) y cinco controles. Posteriormente, de esta cohorte se seleccionaron 12 microARNs para ser validados y analizados en muestras de piel de 44 pacientes con psoriasis en placas. En 15 de estos pacientes se obtuvo una muestra adicional después de tres meses de tratamiento biológico. El análisis de los resultados mostró una disminución de la expresión de miR-9-5p, miR-133a-3p y miR-375 en piel lesional de los pacientes con psoriasis. Después del tratamiento, la expresión de miR-133a-3p, miR-375, miR-378a y miR-135b en las lesiones residuales retornó a los niveles observados en la piel no lesional. Por otro lado, la disminución de los niveles de expresión de miR-135b después del tratamiento con terapias biológicas se asoció, tanto con la mejoría de los pacientes evaluada mediante la escala del índice de gravedad y área de psoriasis (PASI), como con la disminución de la respuesta inflamatoria local. Además, la expresión basal de miR-135b junto con la edad se asoció con la mejora de la psoriasis, lo que sugiere su posible utilidad como biomarcador pronóstico. En una segunda parte del trabajo, el objetivo fue el de caracterizar la expresión de distintas firmas de microARNs circulantes en suero que se pudieran emplear como biomarcadores predictivos de desarrollo y de gravedad. En esta segunda fase, se realizó un trabajo multidisciplinar, incluyendo en el estudio no sólo pacientes con psoriasis, sino con otras IMIDs: enfermedad de Graves (EG) y artritis reumatoide (AR). Se incluyeron un total de 78 sujetos: 20 sujetos control, 20 pacientes con psoriasis, 19 pacientes con EG y 19 pacientes con AR. Mediante ensayos de reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa (RT-PCR) se estudió la expresión en suero de un panel de microARNs asociados a la respuesta inmune. Se analizaron las diferencias entre las distintas enfermedades y, en su caso, según la gravedad de éstas. Nuestros resultados mostraron que los niveles circulantes de miR-19b y miR-26b disminuyeron significativamente (p<0,001) en pacientes con IMIDs en comparación con los sujetos control. Además, el análisis de las curvas ROC (Receiver Operating Characteristic) mostró que estos microARNs eran discriminadores adecuados capaces de identificar la presencia de una IMID, con áreas bajo la curva (AUC) de 0,85 y 0,83, respectivamente. Asimismo, establecimos que, tanto el miR-19a, como el miR-143, aumentaron significativamente en pacientes con IMIDs con enfermedad grave (p <0,05). En resumen, nuestros hallazgos identificaron dos firmas de microARNs diferentes. Una de ellas está asociada a la presencia de psoriasis u otras IMIDs y podría conducir al desarrollo de herramientas para su detección temprana. La segunda firma es capaz de discriminar entre formas leves y graves de estos trastornos y podría ser una herramienta para seleccionar pacientes candidatos a un tratamiento más intenso de forma precoz.