El factor de crecimiento de tejido conectivo: Modulador redox y citoquina proinflamatoria implicada en la génesis del daño vascular

Resumen

El factor de crecimiento de tejido conectivo (CCN2/CTGF), es un gen de desarrollo que se encuentra rexpresado en determinadas condiciones patológicas. El gen de CCN2 codifica para una proteína matricelular compuesta por cuatro módulos, la cual puede ser degradada en diferentes fragmentos que presentan actividad biológica por sí mismos. Entre estos fragmentos, se ha descrito que el módulo IV C-terminal, denominado en este trabajo CCN2(IV), es capaz de regular varias funciones celulares. Tradicionalmente, CCN2 se ha considerado como un mediador de las respuestas fibróticas inducidas por otros factores como TGF-ß, Ang II, o ET-1, aunque estudios más recientes sugieren que CCN2 podría tener también un rol importante en la activación de la respuesta inflamatoria. A nivel cardiovascular, se ha descrito un aumento en la expresión tisular de CCN2 en diversas patologías, incluida la aterosclerosis o la fibrosis cardiaca, aunque sus efectos directos sobre la pared vascular no han sido investigados. En el desarrollo de las enfermedades cardiovasculares, se ha descrito la implicación de numerosos procesos moleculares y rutas de señalización, como son la respuesta inflamatoria, el aumento en la producción de ROS o la fibrosis. Como primer objetivo, se quiso determinar si en situaciones de daño vascular existía una asociación entre los niveles de CCN2 y la producción de ROS, utilizando para ello un modelo de infusión de Ang II en ratones. Una vez comprobado que en las aortas de los ratones tratados con Ang II existía un aumento en la producción de O2 .- y que este se localizaba principalmente en las mismas zonas donde se observó un aumento de CCN2, se evaluó la hipótesis de que CCN2 podría estar regulando de forma directa procesos redox a nivel vascular. Por todo esto, el principal objetivo del presente trabajo fue investigar si CCN2(IV) podía inducir, de forma directa, un aumento en la producción de ROS, para lo cual se realizaron estudios en CMLVs y CEs en cultivo, y en aorta de ratón ex vivo e in vivo. Como segundo objetivo, se investigó si CCN2(IV) regulaba la función vascular e inducía procesos inflamatorios y fibróticos. Los resultados obtenidos indicaron que CCN2(IV), tanto en células en cultivo como en aorta de ratón in vivo, producía un aumento en la producción de O2 .- y en la actividad NAD(P)H oxidasa. Además, el tratamiento con CCN2(IV) aumentó la respuesta contráctil vascular, generó disfunción endotelial, e indujo la activación de respuestas proinflamatorias, como son la activación de la ruta NF-¿B y la producción de mediadores proinflamatorios. Sin embargo, a los tiempos estudiados, CCN2(IV) no generó un aumento en los niveles de diversos factores profibróticos. Mediante abordajes farmacológicos y silenciamiento génico, demostramos que CCN2(IV), vía Nox1, causó un aumento en la producción de O2 .- en aorta de ratón, el cual dio lugar a disfunción endotelial, a un aumentó en la nitrosilación proteica y a una activación de la respuesta proinflamatoria. Finalmente, se demostró que EGFR era el receptor a través del cual CCN2(IV) ejercía sus acciones vasculares. En conjunto, estos resultados muestran que CCN2 puede actuar como una citoquina proinflamatoria y regular procesos redox mediante la activación del EGFR a nivel vascular, ampliando la visión tradicional de CCN2 y remarcando su importancia en las patologías cardiovasculares.