Estudio a nivel celular de la germinación del polen, emisión y elongación del tubo polínico en el olivo(olea europaea l)

Résumé

Este estudio es una contribucion al conocimiento de la germinacion del polen del olivo y al desarrollo del tubo polínico. Inicialmente se ha desarrollado una aproximación a la germinación del polen en el estigma. Se optimizaron el medio y las condiciones de germinación alcanzándose un rendimiento del 60%. Para la puesta a punto de la germinación del polen "in vitro" se requirió:1º) optimizar las condiciones de almacenamiento de polen con objeto de disponer de material durante todo el año, 2º) determinar la calidad del polen mediente test de viabilidad, y 3º)modificar diferentes factores en el medio con objeto de determinar los más idóneos para el polen del olivo. A continuación se hizo un seguimiento de la germinación "in vitro", mediante microscopía óptica y de fluorescencia, utilizando tinción de dapi, que permite visualizar la trayectoria de los núcleos vegetativo y generativo durante la germinación. Seguidamente se han estudiado los cambios ultraestructurales que tienen lugar durante la hidratación, la germinación y el crecimiento del tubo polínico mediante microscopía electrónica. La utilización de tinciones específicas e inmunocitoquímicas ha permitido seguir el comportamiento de los polisacáridos a nivel de paredes, los lípidos de reserva y la proteína alergénica mayoritaria. Finalmente se han obtenido protoplastos a partir de tubos polínicos mediante tratamiento enzimático y se ha examinado su viabilidad y capacidad de regenera la pared celular.