Oligomerización de CXCR4, una nueva diana para modular las funciones mediadas por CXCL12.

Resumen

En ésta tesis se explora la posibilidad de utilizar el proceso de oligomerización del receptor CXCR4 como diana molecular para encontrar compuestos aromáticos de bajo peso molecular que actúan como antagonistas alostéricos del receptor, y por lo tanto podrían tener interés farmacológico. Partiendo de una librería de 3000 compuestos se realizo un primer cribado in silico para seleccionar candidatos que interactuasen en el extremo N-terminal del TMVI, una región crítica para la oligomerización. Los candidatos seleccionados fueron cribados con un ensayo funcional de antagonismo de CXCR4 realizado en experimentos de transwell. La capacidad de los candidatos de bloquear la agregación del receptor mediada por el ligando fue estudiada por microscopía TIRF. A partir de aquí caracterizamos funcionalmente el efecto de los compuestos antagonistas y bloqueantes de la oligomerización en distintos ensayos de migración, señalización, internalización, flujo de calcio... Para proceder a continuación a validar el sitio de interacción de los compuestos Por último, los candidatos más prometedores se pusieron a prueba en un modelo murino de homming de neutrófilos a médula ósea. (Tesis sometida a proceso de confidencialidad)