Desarrollo de métodos in vitro para la determinación de la penetración en el sistema nervioso central y nuevos híbridos anti-alzheimer derivados de tacrina o de dibencilmetilamina

Resumen

La tesis está dividida en dos capítulos: En el Capítulo I se han desarrollado se han puesto en marcha dos tipos de experimentos in vitro para evaluar la penetración de moléculas en el SNC: difusión horizontal a través de membranas artificiales y la metodología PAMPA. En ambos, la barrera biológica se ha simulado empleando un extracto lipídico de cerebro de cerdo soportado en un filtro. El método de difusión horizontal tiene como ventaja que permite realizar estudios cinéticos, pero su principal inconveniente es su lentitud y que se necesitan cantidades relativamente elevadas de producto.El método PAMPA es más rápido, reproducible y de menor coste que el anterior. Permite la evaluación de series en poco tiempo y requiere poca cantidad de producto, entre 1 y 5 mg suelen ser suficientes para la evaluación in vitro de la penetración en el SNC. Empleando la metodología PAMPA, se ha optimizado el empleo de diferentes cosolventes en varias proporciones para poder evaluar moléculas de limitada solubilidad acuosa. Concretamente, se ha validado el empleo de mezclas PBS : etanol (90:10, 80:20 y 70:30), PBS : PEG-400 (90:10 y 80:20) y PBS : MeCN (90:10). Y en en Capítulo II se han obtenido varias familias de moléculas multifuncionales con propiedades colinérgicas, antioxidantes, neuroprotectoras y neurogénicas, dirigidas a un potencial tratamiento de la enfermedad de Alzheimer. Empleando fragmentos de conocidos inhibidores de AChE, se han diseñado híbridos derivados de tacrina y de N,N-dibencil(N-metil)amina, que en algunos casos han mostrado mejores propiedades biológicas que los fragmentos que los componen. Se han optimizado métodos de síntesis y se ha realizado la asignación de los datos espectroscópicos de 1H- y 13C-RMN de los productos obtenidos.