Development and validation of an HPLC–MS method for a simultaneous measurement of oxalate and citrate in urine

Resumen

Objetivos La hiperoxaluria e hipocitraturia están consideradas el principal factor de riesgo en la formación de cálculos renales de oxalato cálcico. En este trabajo se ha desarrollado un método de HPLC-MS para la medida simultánea de oxalato y citrato en orina. Métodos La preparación de muestras se realizó por una extracción líquido-líquido con etilacetato. La separación cromatográfica se llevó a cabo en una columna C-18 a 35 °C con un gradiente de elución con metanol y ácido fórmico 1 M. El citrato y el oxalato se monitorizaron mediante espectrometría de masas con un cuadrupolo simple. Resultados El método fue lineal para el oxalato en el rango de concentración de 0,5 a 450 mg/l y para el citrato de 2,5 a 950 mg/l. El límite menor de intervalo de medida fue de 0,56 mg/l para el oxalato y de 2,5 mg/l para el citrato. La imprecisión intradía fue del 6% para el oxalato y del 3% para el citrato, y la interdía fue inferior al 15% para ambos analitos. El método de LC-MS desarrollado se comparó con un método de electroforesis capilar y se demostró que ambos eran intercambiables para el oxalato, pero no para el citrato. Conclusiones El método de HPLC-MS desarrollado constituye una buena aproximación para medir oxalato y citrato en orina de 24 horas y es aplicable en la rutina clínica para pacientes con riesgo de formación de cálculos renales.