Análisis genético de los dominios funcionales implicados en la formación del intermediario fosforilado de la H+-ATPasa de "Saccharomyces cerevisiae"
- Maldonado Alconada, Ana M.
- Francisco Portillo Pérez Director
Universidade de defensa: Universidad Autónoma de Madrid
Fecha de defensa: 04 de xullo de 1996
- Carlos Gancedo Rodríguez Presidente/a
- Rafael Garesse Secretario/a
- Iñigo Fernández de Larrinoa Santamaría Vogal
- Rosario Lagunas Gil Vogal
- José Martínez Peinado Vogal
Tipo: Tese
Resumo
Mediante mutagenesis dirigida se han identificado una serie de aminoácidos esenciales para la función de la h-atpasa. El residuo lys474, está localizado en el sitio de unión de atp, y la caracterización bioquímica de enzimas portadores de la mutación k474r sugiere que este residuo está implicado en la formación del intermediario fosforilado. La lys474 es el sitio de unión del análogo de la adenosina, fluoresceína isotiocianato. Para identificar regiones del enzima implicadas en la formación del intermediar fosforilado hemos realizado un análisis de supresión intragénica de la mutación k474r. Una de las mutaciones supresoras, v396i, es especifica de alelo y está localizada cerca del residuo que es fosforilado durante el ciclo catalítico. Tres mutaciones supresoras, v484i, v484i/e485k y e485k/e486k, podrían compensar la alteración estructural introducida por la mutación k474r. Por último, tres mutaciones supresoras, a165v, v169i/d170n y p536l, no son específicas de alelo y parece que afectan a la localización del enzima en la membrana.