Efecto a largo plazo de las técnicas de reproducción asistida en el modelo murino

Resumen

Las técnicas de reproducción asistida son ampliamente utilizadas en infertilidad humana y en producción de especies ganaderas, sin embargo, las consecuencias de la manipulación embrionaria durante el desarrollo preimplantacional no están bien caracterizadas; incluso algunas manipulaciones han empezado a aplicarse en tratamientos de infertilidad humana sin haber sido analizadas en un modelo animal. En esta tesis, utilizando el modelo murino, hemos examinado el efecto a corto y largo plazo de tres manipulaciones habitualmente realizadas en el embrión. Hemos analizado el efecto de un cultivo in vitro subóptimo, el efecto de una fecundación mediante ICSI utilizando espermatozoides con DNA fragmentado, y el efecto de la transferencia asincrónica de los embriones. Hemos desarrollado un cultivo subóptimo por adición de FCS al medio comprobando cómo altera la expresión de genes de imprinting, que afecta a las tasas de producción de blastocistos y su número de células, así como a la implantación. Además, los animales producidos mediante este cultivo subóptimo presentan ciertos fenotipos que afectan al desarrollo de los neonatos, al metabolismo y al comportamiento del animal adulto. La ICSI usando espermatozoides con DNA fragmentado también produce alteraciones epigenéticas en el blastocisto, reduciendo las tasas de producción de blastocistos y de implantación. Además, en el animal adulto induce obesidad y alteraciones del comportamiento, como ansiedad y memoria. Pero además, el protocolo de congelación empleado para producir espermatozoides con DNA fragmentado provoca acortamiento de telómeros, que se ve reflejado en un envejecimiento temprano y desarrollo de cáncer de los animales, incrementando la tasa de mortalidad. En tercer lugar, hemos analizado la transferencia embrionaria y el efecto de la asincronía entre el estadio del embrión y la receptora, con transferencias sincrónicas de zigotos o blastocistos y transferencias asincrónicas de blastocistos, comprobando que la asincronía no afecta al embrión debido al fenómeno de la diapausa. Sin embargo, hemos observado que la transferencia de blastocistos afecta al peso al nacer, la presión sistólica de los adultos y la ansiedad, mientras el zigoto es mucho menos sensible que el blastocisto a la hora de ser transferido, posiblemente porque el genoma embrionario aún no se ha activado y contienen mayor plasticidad.