Evaluación de la línea genéticamente atenuada Li-delta-hsp70-II como vacuna contra la leishmaniosis cutánea y visceral en el modelo ratón

Resumen

Las leishmaniosis son un grupo de enfermedades parasitarias que causan una gran morbilidad y mortalidad en diversas regiones del mundo. Debido a que los pacientes curados son resistentes a nuevas infecciones la vacunación se muestra como el método más eficaz para controlar la enfermedad. Sin embargo, todavía no ha sido posible aplicar una vacuna profiláctica en humanos. Algunos candidatos basados en subunidades del parásito son capaces de generar protección, pero solo a corto plazo en ausencia de dosis de recuerdo. En cambio, la leishmanización, que consiste en la inoculación en zonas ocultas de la piel de parásitos causantes de leishmaniosis cutánea, sí se ha mostrado capaz de conferir una protección robusta y duradera, pero su uso actualmente está limitado por cuestiones de bioseguridad. En ese sentido, la utilización de parásitos genéticamente atenuados se presenta como una estrategia prometedora para generar vacunas tan eficaces como la leishmanización, pero más segura. Resultados preliminares del grupo indicaron que la inoculación por vía intravenosa de una cepa deficiente en el gen hsp70-II de Leishmania infantum (Li∆hsp70-II) confería protección a corto plazo frente a la infección con L. major en ratones BALB/c. Basados en la hipótesis de que la cepa Li∆hsp70-II podría ser utilizada como vacuna atenuada, en este proyecto de Tesis se han analizado las propiedades inmunogénicas y profilácticas de esta línea celular utilizando la inoculación por vía intravenosa (i.v.) y subcutánea (s.c.) en ratones BALB/c y s.c. en C57BL/6. La vacuna produce una infección asintomática y autolimitada que genera una respuesta inmunitaria celular TH1 capaz de conferir protección duradera frente a la infección con L. major, en ambas cepas de ratón y con L. infantum, L. amazonensis y L. braziliensis en ratones BALB/c. Los resultados indican que el mecanismo de protección se basa en la inducción de una respuesta efectora mediada fundamentalmente por linfocitos T CD4+ y CD8+ productores de IFN-γ, que son reclutados rápidamente al sitio de infección. Así, en ratones BALB/c vacunados, tanto por vía i.v. como por vía s.c., se produce una respuesta TH1 capaz de controlar la infección contra L. major, reduciendo la carga parasitaria y limitando el desarrollo de la lesión cutánea. La infección con L. major en los ratones C57BL/6 vacunados por vía s.c. induce una respuesta rápida y moderada de IFN-γ que controla la multiplicación de los parásitos sin causar lesiones inflamatorias. La infección con L. infantum en ratones BALB/c vacunados por vía s.c. produce una respuesta mediada por IFN-γ que disminuye el número de parásitos y acelera la curación en el hígado. Los ratones BALB/c vacunados por vía s.c. muestran tras la infección con L. amazonensis o L. braziliensis una menor carga parasitaria y no desarrollan la patología. Estos estudios demuestran que la línea Li∆hsp70-II es una vacuna segura que induce una respuesta celular suficiente como para proteger de la infección a largo plazo con varias especies causantes de las principales manifestaciones clínicas de la leishmaniosis.