Estudio de microorganismos de la clase "Mollicutes" en organismos marinos

Resumen

RESUMEN DE TESIS Orestes M. Vega Orellana La presente tesis describe el estudio de microorganismos de la Clase Mollicutes en organismos marinos. El primer capítulo corresponde a la justificación, a una revisión bibliográfica de las bases teóricas del estudio, así como sus objetivos propuestos. El segundo capítulo concierne a la elección de la pareja de cebadores de Van Kuppeveld y colaboradores (1992) para la detección de mollicutes a través de una PCR a tiempo real. Fueron escogidos por su adecuada especificidad y sensibilidad después de compararlos con otros cuatro pares de cebadores específicos para la detección de mollicutes indicados por otros autores. El tercer capítulo relata la metodología y resultados de la búsqueda de mollicutes en 72 cetáceos varados en el Archipiélago Canario entre los años 2010-2013, 80 pinnípedos de la Antártica (2010-2011), 112 peces de acuicultura o del medio natural, 12 grupos entre 30 a 40 medusas y 9 cefalópodos. Para su detección e identificación fueron utilizadas técnicas rutinarias de cultivo de mollicutes y de genética molecular. El análisis de la secuencia entera o de fragmentos de los genes ARNr 16S y ARNr 23S, así como de la región intergénica entre ellos (ISR) fue una valiosa herramienta para la identificación taxonómica de las especies encontradas, cuando fue posible. En los cetáceos fueron identificadas cuatro especies de mollicutes: Mycoplasma sp. CSL7529-conjunctiva zalophus (99% - gen ARNr 16S), Mycoplasma sp. Phocoena C-264-GEN (97%- ISR), Mycoplasma sp. AB703210 (98%- gen ARNr 16S) y Acholeplasma axanthum AJ311394 (93%- gen ARNr 16S). Adicionalmente, fueron detectados mollicutes en siete especies, aunque no fue posible su identificación debido a la poca cantidad de ADN disponible. En los pinnípedos de la Antártica fueron aisladas, cultivadas e identificadas seis especies de mollicutes: M. zalophidermidis (99% - ISR), M. sp. CSL7529-conjunctiva (99% - ISR), M. sp. Mirounga ES2805-ORL (99% - ISR), M. sp. Mirounga ES2774-NASSP4 (91%- ISR), M. lipofasciens ATCC 35015 (78% - ISR) y M. zalophi (99% - ISR. En ninguno de los casos fue posible establecer algún tipo de relación entre la presencia de mollicutes y patologías presentes. Por otra parte, fueron detectados mollicutes en dos ejemplares de dorada Sparus aurata (branquia e intestino) pero no pudieron ser identificados ni cultivados. En las medusa Pelagia nocticula fue detectado un Spiroplasma sp., mientras que en el pulpo común (Octopus vulgaris) y en pota (Todarodes sagittatus) fueron detectadas, identificadas, aisladas y cultivadas dos especies de mollicutes nuevas, siendo denominadas Myc-PULPO y Myc-POTA, respectivamente. Ambas están relacionadas entre sí pero son muy diferentes a las especies ya conocidas.