Utilidad de la polietilenimina con el gen de la interleuquina 12 en el tratamiento de un modelo murino de cancer de ulmon y de metastasis pulmonares de cancer de colon

Abstract

TITULO: UTILIDAD DE LA POLIETILENIMINA CON EL GEN DE LA INTERLEUQUINA-12 EN EL TRATAMIENTO DE UN MODELO MURINO DE CÁNCER DE PULMÓN Y DE METÁSTASIS PULMONARES DE CÁNCER DE COLON RESUMEN: Tratamos de caracterizar la formación de complejos de polietilenimina (22kDa y estructura lineal) con ADN (PEI-ADN) evaluando su carga eléctrica, tamaño, grado de compactación, protección del ADN en su interior y eficacia a la hora de transferir genes a células en cultivo. Posteriormente estudiamos la biodistribución y duración de la expresión del transgén tras la inyección intravenosa de los complejos en ratones. Por último, evaluamos la eficacia del tratamiento intravenoso con complejos PEl-interleuquina-12 (PEI-IL12) en modelos murinos de cáncer de pulmón con células LLC en ratones C57/BL6 y de metástasis pulmonares de cáncer de colon con cálulas CT26 en ratones BalB/c. La PEÍ es capaz de acomplejar el ADN de forma eficaz y de protegerlo frente a la degradación por DNasas. Se obtienen complejos, en suero glucosado al 5% con una relación N/P de 4 y 100 ug de ADN, con carga externa positiva (+50 mv) y de un tamaño en torno a los 200 nm. Estos complejos son capaces de trasfectar in vitro con éxito las líneas celulares LLC y CT26. cuando se inyectan de forma intravenosa su expresión se localiza principalmente en pulmón con un pico de expresión a las 6 horas y una duración de al menos una semana. La inyección de complejos PEI-IL12 y PEI-Lacz por vía intravenosa es capaz de ejercer efectos antitumorales en los modelos de cáncer de pulmón y de metástasis pulmonares. En el modelo de cáncer de pulmón la eficacia es similar en ambos grupos pero en el modelo de metástasis pulmonares la eficacia es mayor con PEI-IL12. Estos efectos están mediados por la elevación de los niveles de IL-12 y de iFN-y murinos. La IL-12 se produce principalmente por macrófagos presentes en el hígado. En el modelo de metástasis pulmonares con CT26 se producen LTc específicos frente al tumor en los grupos tratados con PEI-Lacz y PEI-IL 12, esto no ocurre en el modelo de cáncer de pulmón con LLC.