Quimiosensibilidad "in vitro" ensayos predictivos en lineas leucemicas

Resumen

Se han evaluado tres ensayos predictivos de quimiosensibilidad "in vitro" en 2 lineas leucemicas: l1210 (una leucemia aguda murina inducida por metilcolantreno, sensible) y k562 (linea obtenida a partir de una crisis blastica de una leucemia mieloide cronica, resistente). Las celulas se incubaron con farmaco durante 1 hora y se evaluo la viabilidad. Los farmacos utilizados fueron: cisplatino, adriamicina, actinomicina d, metotrexate 5-fluorouracilo y citarabina. La clonogenicidad se conto tras 7 dias de cultivo en una doble capa de agar semisolido de acuerdo con el metodo de salmon y hamburger. Se evaluo la exclusion de colorante tras 36 horas de cultivo de acuerdo con el metodo descrito por weisenthal. El ensayo antimetabolico se midio por la incorporacion de timidina y uridina durante 1 hora despues de 3 horas o 1 hora de exposicion a farmaco, de acuerdo con el metodo de volm. Se aplico un modelo de regresion monoexponencial a cada ensayo, tomando como variable independiente la concentracion de farmaco. Se obtuvo la correlacion linear entre cada ensayo con el ensayo clonogenico, mostrando que la adriamicina y la actinomicina d presentaban coeficientes de correlacion superiores a 0.95. Se estudio el efecto de la centrifugacion y la incubacion con anfotericina sobre la inhibicion del metabolismo de acidos nucleicos inducido por quimioterapia. La anfotericina b mostro sinergismo con la quimioterapia, alcanzando un valor estadisticamente significativo en el caso de citarabina en la linea k562. La incubacion de antimetabolitos durante 1 hora no mostro inhibicion de clonogenicidad, pero la exposicion continua fue marcadamente citotoxica. La exposicion continua de 5-fluorouracilo tras exposicion corta a cisplatino, y la exposicion continua a citarabina tras exposicion corta a adriamicina, mostraron sinergismo en el ensayo clonogenico, confirmando los hallazgos descritos en clinica.