Efecto antitumoral de la vacunación con fusiones de células dendríticas y células tumorales en síndromes linfoproliferativos

Resumen

La utilización de DCs como célula presentadora de antígeno por excelencia y su eficacia a la hora de generar respuestas antitumorales es bien conocida. Si a eso le añadimos la introducción de antígenos tumorales de tal manera que se posibilite la expresión antigénica tanto por moléculas del MHC de clase I como por moléculas del MHC de clase II, en un contexto de coestimulación adecuada y sin tener la necesidad de identificar dichos antígenos, podríamos generar una vacuna con una alta eficacia antitumoral y con muchas posibilidades de aplicación clínica. La fusión de células dendríticas con células tumorales constituye un procedimiento de terapia celular novedosa. El resultado es un híbrido celular que combina la expresión de todas las moléculas que se necesitan para la correcta activación de los linfocitos T con la presentación de un gran repertorio de antígenos procedentes del tumor, bien sean conocidos o no. Este trabajo se inició con la finalidad de explorar nuevas estrategias terapéuticas para inducir una respuesta inmune antitumoral en dos modelos murinos de linfoma (B y T) mediante la utilización de DCs y células tumorales fusionadas. En el linfoma B, la vacunación profiláctica con las fusiones dieron lugar a la protección frente al tumor del 40±5% de los ratones. En el linfoma T la vacuna profiláctica indujo una protección antitumoral del 100%. La administración terapéutica de fusiones en el linfoma B indujo un aumento en el tiempo de supervivencia y consiguió curar al 10% de los animales. Sin embargo, en el linfoma T la administración de fusiones no tuvo ninguna eficacia antitumoral. Numerosos estudios han demostrado la importancia de la activación de los linfocitos T a través de la señalización CD40-CD40L y del aumento de la eficacia de las DCs como célula presentadora de antígenos. En nuestro estudio quisimos mejorar la efectividad de las vacunas con fusiones celulares generando fusiones celulares que expresaran CD40L mediante la transducción con un adenovirus que codifica para la porción extracelular del receptor CD40L (Adv-CD40L). Antes de la transducción con Adv-CD40L no se detectaba expresión de CD40L en las fusiones celulares, células dendríticas o células tumorales. Sin embargo, la expresión de CD40L en las fusiones celulares transducidas con Adv-CD40L (FC-CD40L) oscilaba entre el 50-60%. Además, las FC-CD40L mostraban un aumento de expresión de moléculas de coestimulación (CD80, CD86), adhesión (CD54) y de moléculas del MHC de clase II y generaban una mayor respuesta inmune en un cultivo mixto singénico en comparación con las fusiones celulares sin transducir o transducidas con un adenovirus control. Asimismo, las FC-CD40L muestran una migración incrementada a órganos linfoides secundarios, sobre todo al bazo y ganglios linfáticos. Por otro lado, los esplenocitos de ratones tratados con vacunas con FC-CD40L tuvieron un dramático incremento en la producción de IL-2, IL-6, IL-17 e IFN lo que sugería un tipo de respuesta tipo Th1 y Th17. In vivo, el tratamiento con vacunas de FC-CD40L en ratones con linfoma B establecido indujo regresión de los tumores y una supervivencia del 40% de los ratones. Por el contrario, la vacunación terapéutica con FC-CD40L en el linfoma T no produjo ningún efecto antitumoral. En nuestro esfuerzo por mejorar los resultados anteriores y encontrar una vacuna aún más potente, decidimos probar otra estrategia. Nos planteamos una terapia antitumoral con vacunas de fusiones más ¿-galactosilceramida, un adyuvante de las células NKT. La administración de ¿-galactosilceramida conjuntamente con fusiones DC/tumor aumenta significativamente su efecto terapéutico erradicando el tumor en el 90% de los animales con linfoma B; su efecto antitumoral en el modelo de linfoma T es, sin embargo, menor.