Regulación del metabolismo lipídico en pecescaracterización y papel fisiológico del lxr

Resumen

En la presente tesis se han analizado diferentes aspectos de la regulación del metabolismo lipídico en dorada, salmón y trucha. En dorada se ha analizado las diferencias a nivel transcripcional según el grado de adiposidad mostrando una elevada expresión de genes pro-lipogénicos en animales con alto contenido de grasa mesentérica. A su vez, se observó el efecto lipolítico del factor de necrosis tumoral ¿ (TNF¿) sobre adipocitos aislados individualmente de cada dorada. Los resultados mostraron la activación de diferentes vías mediante el TNF¿ mostrando el carácter multifuncional de esta citoquina. En dorada también se analizó los efectos de una doble sustitución de aceite y proteína de pescado por componentes vegetales sobre el metabolismo de los adipocitos. Los cambios nutricionales mostraron un aumento de la actividad lipolítica de las células, un aumento del tamaño celular, menor sensibilidad a agentes lipolíticos y menor respuesta a la insulina. Además, se identificó y caracterizó un factor de transcripción involucrado en el metabolismo de los ácidos grasos y el colesterol, el receptor X de hígado (LXR). En las tres especies analizadas (salmón, dorada y trucha) solo se encontró una isoforma mas parecida en cuanto a secuencia aminoacídica al LXR¿ de mamíferos. Estudios in vitro en adipocitos y miocitos de trucha, el LXR muestra diferencias de regulación. El LXR en miocitos regula genes implicados en el transporte del colesterol, síntesis y acumulación de ácidos grasos como: lipoproteína lipasa (LPL), sintasa de ácidos grasos (FAS), ATP binding cassette A1 (ABCA1), receptores peroxisomales proliferadores activados ¿ y ß (PPAR¿ y PPARß). En cambio en adipocitos el LXR está más implicado en la lipólisis, adipogenesis y el transporte del colesterol. Se llevaron a cabo experimentos in vivo de ayuno y realimentación para observar la respuesta a nivel transcripcional del LXR, los genes diana para el LXR y genes relacionados en el metabolismo lipídico. El ayuno produjo una disminución de genes pro-lipogénicos (LXR, FAS y LPL) en tejido adiposo e hígado. En cambio en músculo la expresión de la LPL fue incrementada para promover la captación de ácidos grasos. El patrón de expresión del PPARß mostró gran relevancia en los procesos catabólicos inducidos por el ayuno. Respecto al proceso de realimentación, todos los parámetros morfológicos, plasmáticos y transcripcionales analizados fueron recuperados, mostrando la habilidad compensatoria en una situación posterior a procesos de ayuno descrita previamente en peces. Además, se analizó el efecto de la administración in vivo en trucha de la insulina y agentes pro-inflamatorios como el TNF¿ y el lipopolisacárido (LPS) sobre los genes posteriormente analizados. La insulina demostró sus efectos anabólicos mediante la regulación de genes pro-lipogénicos (LPL y FAS) en los tejidos analizados (tejido adiposo, hígado, músculo rojo y blanco). Los agentes pro-inflamatorios disminuyeron la expresión de genes implicados en la lipogénesis en hígado (FAS y LPL) y el LXR no mostró una gran implicación en la respuesta inflamatoria mediada por el TNF y el LPS. Aunque se ha sugerido que el TNF¿ es un posible mediador de la acción del LPS, la regulación de los genes analizados muestra diferencias en comparación al LPS. Estas diferencias pueden estar relacionadas al efecto secretor de diversas citoquina por parte del LPS.