Preparació de receptors moleculars selectius d'origen sintètic i biològic i desenvolupament d'aplicacions per l'análisi de biocides i tensioactius en mostres aquoses

Résumé

La tesis presentada ha ido dirigida a la preparación de anticuerpos policlonales y MIPs (Polímeros de Huella Molecular) para el desarrollo de metodologías de análisis para la detección de contaminantes ambientales. Se han producido anticuerpos para el Nonilfenol, principal producto de degradación de los tensioactivos no iónicos poliretoxilados, con los que se ha desarrollado un ELISA con una detectabilidad de 2.3 ug/l. La naturaleza del analito y de los haptenos usados como competidores ha resultado clave para el desarrollo del ensayo con elevada reproducibilidad (especialmente debido a su lipofilia), de manera que ha sido necesario preparar antígenos de tapizado usando una macromolécular hidrofílica como el aminodextrano. Por otro lado, se han producido anticuerpos para los sulfofenilcarboxilatos (SPCs), productos de degradación de los LAS, OTRA familia de tensioactivos. Para ello se ha considerado una estrategia de inmunización heteróloga, basada en la mezcla de inoculación de compuestos. Se diseñaron dos haptenos distintos con los que se produjeron 3 familias de antisueros. Con cada familia se desarrolló un ELISa, by en cada caso se ha estudiado el efecto de hapteno de inmunización usado sobre la especificidad y sensibilidad de los mismos. Por otro lado se ha abierto una línea de trabajo dirigida a la preparación y evaluación de MIPs. Considerando como analito el Irgarol 1051, se ha puesto a punto una metodología de preparación del receptor así como de evaluación y caracterización del mismo, tanto como receptor molecular selectivo (mediante la determinación de la afinidad y la capacidad) y como fase de extracción selectiva.