Lipasas estudios de activación en síntesis de surfactantes alcanolamidas

Resumen

La presente Tesis Doctoral ha abordado el estudio de lipasas con dos orientaciones distintas (i) fenómenos de activación/inhibición de lipasas en presencia y ausencia de interfases, y (ii) la síntesis enzimatica de emulgentes no iónicos con enlace amida, alcanolamidas, que presentan entre otras ventajas al ser biodegradables y quimicamente muy estables icluso en medios alcalinos. Los estudios de activación/inhibición de lipasas se han realizado con el fin de profundizar en el conocimiento del fenómeno de activación interfacial exclusivo de estas enzimas, utilizando un sistema modelo isoenzimas de C.rugosa con alta homología en secuencia y marcadas diferencias en su especificidad por substratos y respuesta en presencia de interfases. Para ellos se han empleado tecnicas de espectroscopia UV, dicroismo circular, fluorescencia entre otras. Los estudios de biotransformaciones de orientación aplicada han sido realizados dadas las ventajas de la biotransformaciones frente a la sintesis quimica tradicional, especialmente el uso de las enzimas en medios organicos anhidridos. Para llevar a buen termino los estudios sinteticos se han realizado un estudio sistematico de ingenieria enzimatica, de la reaccion y del medio, en medios organicos anhidros de distinta polaridad. Los productos han sido caracterizados por tres tecnicas: resonancia magnetica nuclear, espectroscopia de infrarrojo. El estudio sisteático se ha aplicado a dos tipos de amina, una primaria y otra secundaria, determinándose las condiciones más idóneas para una sintesis cuantitativa, en el menor tiempo y condiciones de reacción suaves. Las limitaciones encontradas en los procesos optimizados en condiciones de alta productividad volumetrica, han podido ser minimizadas mediante sustitucion del biocatalizador por otros de mayor actividad (mayor relacion carga/soporte). Ello implicó la preparación de soportes para el biocatalizador a base de sílice activada con res