Obtención de vacunas frente a infecciones producidas por herpes simplex características inmunogénicas de la proteína quimérica gDB
- Domingo Carrasco, Cristina
- Enrique Tabares López Director
Universidade de defensa: Universidad Autónoma de Madrid
Fecha de defensa: 04 de decembro de 2001
- Jesús María García García Secretario/a
- Rafael Fernández Muñoz Vogal
- Esteban Domingo Solans Vogal
- José Manuel Bautista Santa Cruz Vogal
Tipo: Tese
Resumo
Se han estudiado las características inmunogénicas de la proteína quimérica gDB constituida por parte de los extremos aminoterminales de las glicoproteínas gB y gD de herpes simplex tipo 2 (VHS-2). Para ello esta proteína quimérica se ha obtenido en E.coli, así como las correspondientes proteínas individuales gBt y gDt. Tras la inmunización de ratones BALB/c con estas proteínas recombinantes se demostró la capacidad de todas ellas para generar una respuesta humoral específica frente a las proteínas de VHS-2. Del mismo modo, estas proteínas recombinantes demostraron su capacidad para generar cierta protección frente a la infección intravaginal con un aislado clínico de VHS-2, siendo esta protección más evidente cuando ambas proteínas, ya sea de forma conjunta (gBt+gDt) o formando parte de la estructura quimérica gDB, forman parte del antígeno de inmunización. Asímismo, se ha construido un plásmico capaz de expresar en eucariostas la proteína quimérica gDB (pcgDB), así como los plásmidos correspondientes a las proteínas individuales (pcgBt y pcgDt), con el objeto de estudiar su utilidad como vacuna de DNA. En primer lugar, se determinó in vitro la correcta expresión de las proteínas codificadas por estos plásmidos, demostrándose que las proteínas recombinantes expresadas se presentan como proteínas no glicosiladas y localizadas que las proteínas recombinantes expresadas se presentan como proteínas no glicosiladas y localizadas en el citoplasma celular. A su vez, la expresión in vitro de estas proteínas se extingue tras un breve periodo de tiempo, debido probablemente a la degradación o simplificación de estos plásmidos en el interior celular. Tas la inmunización de ratones BALB/c con los distintos plásmidos se observó como, a pesar de generar una respuesta humoral específica frente a las proteínas de VHS-2, esta respuesta es de menor magnitud que la inducida por las correspondientes prote