Estudio de los factores de transcripción hipofisarios GHF yGHF-2 interacción con los receptores nucleares TR y RXR

Resumen

En este Tesis se ha estudiado la interacción proteína-proteína responsable del sinergismo transcripcional entre el factor hipofisario GFH-1 y los receptores nucleares TR y RXR. Se ha demostrado in vitro la interacción entre GFH-1 y TR, y se han podido identificar los dominios proteicos que participan directamente en la interacción mediante el sistema de los dos híbridos aplicado a levaduras. Estos son los dominios AF-1 y AF-2 de los receptores nucleares y el dominio CHG de GHF-1. Se define, por primera vez, una función molecular en la región de GHF-1 comprendida entre los residuos 72 y 130, implicada directamente en la interacción con proteínas correguladoras de GHF-1. Por otra parte, se han optimizado dos sistemas de expresión y purificación de las proteínas recombinantes rGHF-1 y rGHF-2 en bacterias y se han generado anticuerpos policlonales específicos para estas proteínas. Así mismo, se ha podido comprobar la naturaleza más insoluble de la isoforma rGHF-2, debida a la inserción de 26 aminoácidos producida en el procesamiento alternativo del tránscrito primario de rGHF-1 y que aporta una región de carbacter hidrofóbico que la distingue de rGHF-1..