Estudio del fenómeno de persistencia intracelular de Salmonella typhimurium en células eucariotas on fagocíticas

Résumé

Hemos demostrado la capacidad de determinadas líneas celulares no fagocíticas, NRK y 3T3 para impedir la capacidad de proliferación intracelular de S typhimurium, patógeno considerado hasta el momento capaz de proliferar en cualquier tipo celular no fagocítico. Hemos denominado estos tipos cellares no permisivos. El dato más relevante es la formación de un fagosoma inaccesible a material captado por la célula por la ruta endocítica. Adicionalmente hemos desarrollado un modelo in vitro de persistencia intracelular de Salmonella en células no permisivas. La estancia prolongada de la bacteria en el fagosoma conduce a la aparición de variantes del patógeno que poseen mutaciones en una región del cromosoma no descrita con anterioridad y no presente en la bacteria más emparentada filogenéticamente como es Escherichi coli. Otro fenómeno que hemos descrito es la alteración en el mecanismo de variación de fase en la expresión de flagelina en los mutantes aislados tras los ensayos de persistencia. En estos aislados, se produce un aumento notable en la proporción de bacterias expresando flagelina de tipo 2, llegando hasta un 50%. También hemos demostrado que S. typhimurium modifica la estrucura del antígeno O, componente estructural del lipopolisacárido bacteriano, cuando se adapta al ambiente del interior de la célula eucariota. Hemos iniciado un exhaustivo análisis genético de los elementos reguladores del fenómeno de proliferación y persistencia intracelular de S. typhimurium en el interior de células eucariotas no fagocitícas. Los resultados obtenidos indican que el sistema regulador de dos componentes PhoP/PhoQ controla dicho proceso. Mutantes en este sistema manifiestan un crecimiento activo en células eucariotas no permisivas. En la actualidad se está analizando qué genes de este regulón estarían directamente implicados en la decisión del patógeno para crecer o no en el interior de l