Identificación y caracterización del gen humano 'NRGN' estudio de su regulación por hormona tiroidea

Resumen

RC3/neurogranina es un gen que se expresa específicamente en el cerebro de ratas adultas y codifica neurogranina, una proteína que une calmodulina y es sustrato de la proteína quinasa C (PKC). Se ha propuesto que neurogranina podría estar implicada en procesos de memoria y de aprendizaje. Mediante el rastreo de una genoteca genómica humana, utilizando el cDNA del gen RC3 como sonda, hemos aislado un cósmido que contiene la secuencia completa del gen humano NRGN, homólogo al gen RC3 de rata. El gen NRGN está compuesto por 4 exones separados por 3 intrones. La secuencia deducida para la proteína codificada por NRGN contiene 78 aminoácidos y es muy similar a las secuencias de sus homólogas en otras especies. El análisis de la región anterior al primer exón de NRGN reveló que este gen carece de cajas TATA o CAAT, aunque posee una secuencia consenso para un elemento iniciador, así como para otros elementos reguladores. NRGN expresa un único RNA mensajero de 1.3 Kb, que se detecta en cerebro adulto, mientras que está ausente en pulmón, corazón, hígado, riñón, placenta, páncreas o músculo esquelético. El gen NRGN se ha localizado en el cromosoma 11, en la banda q24, dentro de una región que es sinténica con el cromosoma 9 del ratón. La transcripción del gen RC3 está regulada por hormona tiroidea (T3), y presumiblemente de forma directa a través de los receptores nucleares de T3. El análisis de la secuencia completa del gen NRGN nos permitió localizar un sitio de unión de los receptores de hormona tiroidea en el primer intrón del mismo (T3RE-NRGN). Este elemento contiene dos repeticiones imperfectas del hemisitio consenso AGGTCA separadas por un espaciador de 4 nucleótidos (DR4), y une heterodímeros RXR/T3R de forma estable. El elemento T3RE-NRGN confiere regulación por T3 y T3R a un gen testigo cuando se posiciona delante de un promotor heterólogo, lo que sugiere su posible implicación en la regu