Estudio y mejora de la secreción de proteinas recombinantes en "Escherichia coli"

Résumé

UN MODO DE PRODUCIR PROTEINAS RECOMBINANTES EN ESCHERICHIA COLI ES DIRIGIRLAS AL PERIPLASMA EN VIRTUD DE SU FUSION A UN PEPTIDO SEÑAL. ALGUNAS PROTEINAS RECOMBINANTES SOBREPRODUCIDAS NO SE SECRETAN EFICAZMENTE, ACUMULANDOSE EN EL CITOPLASMA. ESTO PUEDE SER DEBIDO A QUE ALGUN ELEMENTO DE LA RUTA DE SECRECION SE CONVIERTE EN LIMITANTE. ESTO SE PODRIA EVITAR PROPORCIONANDO A LA BACTERIA COPIAS ADICIONALES DE LOS GENES IMPLICADOS EN EL PROCESO DE SECRECION DE PROTEINAS. SE HAN SUPLEMENTADO CEPAS DE E. COLI CON COPIAS DE ESTOS GENES, Y COMO RESULTADO SE HA MEJORADO LA PRODUCCION PERIPLASMICA DE DOS PROTEINAS RECOMBINANTES: A) SE HA MEJORADO LA SECRECION DE LA INTERLEUKINA 6 HUMANA INCIDIENDO EN EL PASO DE LA TRANSLOCACION DE LA PROTEINA A TRAVES DE LA MEMBRANA CITOPLASMICA CON AYUDA DE LOS GENES PR1A4 Y SECE. B) LA MEJORA DE LA SECRECION DEL FACTOR ESTIMULADOR DE COLONIAS GRANULOCITICAS HUMANO SE LOGRO AUMENTANDO LA SOLUBILIDAD DEL PRECURSOR, CON AYUDA DE LOS GENES DNAK Y DNAJ.