Nuevos modelos animales para el estudio del cáncer incremento de la dosis génica de p53 y eliminación del gen Par4

Resumen

PARTE I. GENERACIÓN DE RATONES CON MAYOR DOSIS GÉNICA DE P53 El cáncer puede ser considerado como la consecuencia final de la acumulación de errores genéticos. El papel de p53 como supresor turmoal quedó demostrado por el hecho de que ratones que carecían de este gen se desarrollaban de forma normal pero presentaban tumores a una temprana edad. Nos propusimos llevar a cabo un abordaje distinto y estudiar si la introducción de copias adicionales de p53 consigue aumentar la resistencia frente al desarrollo tumoral. Para evitar una expresión desregulada de p53 generamos animales mediante transgénesis con BACs (Bacterial Artificial Chromosomes), que permiten incluir grandes insertos genómicos que contengan tanto el gen de interés como las regiones que controlan su expresión. Mediante la generación de animales y MEFs (mouse embryonica fibroblastas) que carecían de los alelos endógenos de p53 pero que protaban el alelo transgénico (p53(-/-)(tg/.)) pudimos comprobar que la copia transgénica era funcional. Al estudiar las respuestas mediadas por p53 frente a daño a DNA en animales que portan una copia adicional de p53 (p53(+/+)(tg/.)) comprobamos que existía un refuerzo de la vía de p53. Para comprobar si este refuerzo conduce a una mayor resistencia frente a la congresión tumoral llevamos a cabo protocolos de carcinogénesis química que mostraron que los ratones con tres copias de p53 presentaban una mayor resistencia a la aparición de tumores que ratones con dos copias de p53(p53(+/+). Debido al papel que p53 juega en senescencia celular y a su posible papel en el envejecimiento del organismo estudiamos el proceso de envejecimiento de estos ratones y patologías relacionadas. Los ratones que poseían tres copias de p53 no mostraron síntomas de envejecimiento prematuro en ninguno de los ensayos realizados. La contribución fundamental de este estudio es la demostración de que se puede aumentar la resistencia al