Estudio cinético de la ruta de plegamiento de la proteina CHEY

Abstract

En esta tesis doctoral se ha abordado el estudio del problema del plegamiento de las proteínas. Se ha utilizado como modelo de estudio la proteína quimiotáctica de escherichia coli, CHEY. Los estudios experimentales combinan técnicas de ingeniería de proteínas con diversas técnicas biofísicas (espectroscopia de fluorescencia, dicroísmo circular y flujo parado) para determinar la ruta de plegamiento de esta proteína. Se ha determinado, en primer lugar, el mecanismo de plegamiento de la proteína salvaje caracterizando las especies cinéticas que aparecen en la ruta de plegamiento. En segundo lugar se ha caracterizado energéticamente el estado de transición en la reacción de desplegamiento, mediante el estudio cinético de mutantes puntuales distribuidos a lo largo de la secuencia. Y en último lugar, se ha llevado a cabo el estudio cinético de mutantes con la propensión helicoidal aumentada para obtener información sobre el papel de las interacciones de corto alcance en el plegamiento y profundizar en la ruta de plegamiento de la proteína CHEY.