Aislamiento y caracterización de mutaciones que suprimen el efecto tóxico de la glucosa en mutantes glicolíticos de "Saccharomyces cerevisiae"

Resumen

LA GLUCOSA INHIBE EL CRECIMIENTO DE MUTANTES GLICOLITICOS DE S. CEREVISIAE EN MEDIOS PERMISIVOS. EN UNA CEPA SIN ACTIVIDAD FOSFOGLUCOSA ISOMERASA HEMOS AISLADO MUTACIONES (RGL), QUE PERMITEN EL CRECIMIENTO EN PRESENCIA DE GLUCOSA. EL CRECIMIENTO DE LOS MUTANTES PGI RGL EN PRESENCIA DE GLUCOSA REQUIERE LA RESPIRACION; EN ESTAS CONDICIONES SU CITOCROMO OXIDASA ESTA DESREPRIMIDA. LOS RESULTADOS INDICAN QUE LOS DOBLES MUTANTES PODRIAN USAR LA GLUCOSA VIA PENTOSAS FOSFATO Y POSTERIOR RESPIRACION. USANDO MUTANTES AFECTADOS EN LA FOSFOGLICERATO MUTASA HEMOS AISLADO UNA MUTACION DOMINANTE, DGT1-1, QUE PRODUCE EFECTOS PLEIOTROPICOS INCLUSO EN UN FONDO SILVESTRE. NO SE DETECTA FERMENTACION EN CEPAS DGT1-1 CRECIENDO EN GLUCOSA Y EL CRECIMIENTO ES DEPENDIENTE DE RESPIRACION. CUANDO EL MUTANTE CRECE EN GLUCOSA PRESENTA UN TRANSPORTE DE GLUCOSA MUY DISMINUIDO, SIN EMBARGO, CUANDO CRECE EN GALACTOSA, DICHO TRANSPORTE ES SIMILAR AL DE UNA CEPA SILVESTRE. EL MUTANTE PRESENTA DEFECTOS EN REPRESION CATABOLICA CRECIENDO EN GLUCOSA, PERO NO EN GALACTOSA. AL CONTRARIO QUE EN UNA CEPA SILVESTRE, CUANDO EL MUTANTE CRECE EN GLUCOSA LA EXPRESION DE SNF3 ES ALTA Y LA DE HXT1 Y HXT3 INDETECTABLE. LA SOBREEXPRESION DE HXT1, HXT2 O HXT3 EN EL MUTANTE PROVOCA UNA RECUPERACION PARCIAL DE LA CAPACIDAD FERMENTATIVA Y DE LA REPRESION CATABOLICA. LOS RESULTADOS SUGIEREN QUE DGT1 INTERVIENE EN LA REGULACION DE LA EXPRESION DE LOS GENES DEL TRANSPORTE DE GLUCOSA Y QUE EL TRANSPORTE, DIRECTAMENTE O A TRAVES DE UN FLUJO GLICOLITICO DISMINUIDO, PODRIA ESTAR IMPLICADO EN LA SEÑAL PARA LA REPRESION CATABOLICA.