Estudio molecular y correlación genotipo-fenotipo en Agammaglobulinemias primarias

Resumen

La agammaglobulinemia primaria es una inmunodeficiencia humoral caracterizada por un defecto en la maduración del linfocito B que conlleva una disminución muy importante o ausencia de inmunoglobulinas y condicina una gran susceptibilidad a las infecciones fundamentalmente bacterianas. La gran mayoría de estos pacientes son varones que presentan mutaciones en el gen BTK (tirosina quinasa de Bruton) responsable de la agammaglobulinemia ligada al cromosoma Z (ALX). Se han descrito también defectos en otros cuatro genes, responsables de variantes de la enfermedad, de igual fenotipo clínico y analítico pero con herencia autosómica recesiva. En este estudio hemos analizado una serie de 65 de pacientes de agammaglobulinemia primaria. El diagnóstico de la mayoría de ellos fue establecido en la Unidad de Inmunología del Hospital Universitario La Paz mediante la realización de una historia clínica y un estudio inmunológico que incluía el análisis del componente humoral y celular. Se incluyeron además, pacientes con el mismo diagnóstico procedentes de otros centros sanitarios en los que se solicitaron datos clínicos y analíticos mediante un protocolo de recogida de datos. Éste fue también rellenado a partir de las historias clínicas de los pacientes de nuestra Unidad, lo que permitió disponer d euna base de datos uniforme. Para la identificación del defecto genético responsable de la enfermedad se obtuvo, a partir de sangre periférica, ADN y ARN utilizando técnicas convencionales. También se aislaron células mononucleadas para realizar estudios de expresión de proteínas. Para el análisis genético se emplearon las técnicas de análisis de ligamiento y SSCP como método de cribaje y la secuenciación automática para la caracterización de las mutaciones. En algunos pacientes se emplearon técnicas adicionales como la RT-PCR o el Southern blot. El estudio de la expresión de las proteínas fue realizado mediante