Caracterización de la regulación del promotor a4 de herpes simplex tipo 1 en virus recombinantes del virus de la pseudorrabia

Resumen

El empleo de PRV como agente oncolítico y como vector presenta ventajas sobre otro virus incluyendo a HSV-1. La capacidad de PRV de infectar tejidos humanos pero sin ser patógeno para los humanos, es la ventaja más remarcable que le confiere ventajas adicionales frente al empleo de HSV-1. De hecho, en la actualidad hay un creciente interés en el estudio y la aplicación de PRV como vector. Se han construido los virus recombinantes de PRV gIs8 (gE defectivo) y N1aHTK por la inserción del gen quimérico alfa4 TK en el genoma de la cepa ATK5 de PRV. Esta quimera consiste en la secuencia codificante del gen de latimidina kinasa de HSV-1 bajo el control transcripcional del promotor alfa4 del gen que codifica para la proteína ICP4 de HSV-1. En la infección con los virus recombinantes gIS8 y N1aHTK se observó que la transcripción de la TK de HSV-1 se producía como la de un gen inmediatamente temprano y que además estaba sometida a una regulación negativa, como ocurre en el caso del promotor alfa4 de HSV-1. La expresión de la actividad kinasa de HSV-1 en estos virus recombinantes les confería una mayor sensibilidad a ganciclovir en comparación con la cepa NiA3 salvaje de PRV. La regulación negativa de la transcripción del gen quimérico se debía a la proteína IE180 de PRV como se demostró por transfección de células humanas con el gen de la proteína IE180 y el quimérico alfa4-TK . En este sistema, la proteína transactivadora VP16 de HSV-1 fue empleada como control y se vio como su expresión aumentaba la transcripción del gen quimérico. Estos datos están en concordancia con la similitud funcional existente entre las proteínas IE180 de PRV e ICP4 de HSV-1. Sin embargo, en experimentos adicionale son se detectó complementación entre otras funciones de estas dos proteínas, lo cual podría estar debido a diferencias en cuanto la interacción de éstas con otras proteínas víricas o factores celulares. Además se