Actividades cataliticas de lipoxigenasa en medio acuoso y micelar

Resumen

EN ESTE TRABAJO SE HA CARACTERIZADO LA ACTIVIDAD HIDROPEROXIDASA DE LIPOXIGENASA DE SOJA MEDIANTE EL USO DE DISTINTOS SUSTRATOS NO FENOLICOS DONADORES DE ELECTRONES Y DE INTERES FISIOLOGICO. ESTE ESTUDIO SE HA LLEVADO A CABO TANTO EN MEDIOS ACUOSOS TAMPONADOS COMO EN SISTEMAS MICELARES. EN MEDIOS ACUOSOS TAMPONADOS SE HA ESTUDIADO LA OXIDACION DE FENOTIAZINAS, UN GRUPO DE AGENTES ANTIPSICOTICOS AMPLIAMENTE UTILIZADOS EN EL TRATAMIENTO DE LA ESQUIZOFRENIA, LLEGANDOSE A LA CONCLUSION DE QUE ESTA OXIDACION ES FUERTEMENTE DEPENDIENTE DE LOS SUSTITUYENTES EN POSICION 2- Y 10- DEL ANILLO DE TIAZINA Y ESTABLECIENDOSE UNA GRAFICA, A LA QUE DENOMINAMOS "ENZIMATICA-QUIMICA", QUE RELACIONA LA KM PARA CADA FENOTIAZINA CON LA K'APP DE DESCOMPOSICION DEL RADICAL CATION. TAMBIEN SE HA ESTUDIADO EL MECANISMO DE N-DESMETILACION DE AMINOPIRINA POR LA ACTIVIDAD HIDROPEROXIDASA DE LIPOXIGENASA, LO QUE NOS HA PERMITIDO PROPONER UN NUEVO MODELO DE EVOLUCION DEL RADICAL. ESTE MODELO ES CAPAZ DE EXPLICAR EL EFECTO DEL PH SOBRE LA K'APP DE DESCOMPOSICION DEL RADICAL CATION PREVIAMENTE DESCRITO EN LA BIBLIOGRAFIA PARA OTROS SISTEMAS ENZIMATICOS CON UN GRUPO HEMO EN SU CENTRO ACTIVO. COMO PASO PREVIO PARA EL ESTUDIO DE LA ACTIVIDAD HIDROPEROXIDASA DE LIPOXIGENASA EN MEDIOS NO CONVENCIONALES, CARACTERIZAMOS LA ACTIVIDAD DIOXIGENASA DE ESTA ENZIMA EN UN SISTEMA TERNARIO DE AOT/H2O / ISOOCTANO. PARA ENTENDER EL COMPLEJO COMPORTAMIENTO DE LIPOXIGENASA EN ESTE SISTEMA DESARROLLAMOS UNA HERRAMIENTA GRAFICA (LA "GRAFICA DE LA FASE ACTIVA") QUE EXPLICA EL EFECTO DE LA VARIACION DEL TAMAÑO ( ) Y LA CONCENTRACION DE MICELAS (0) SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA. LA ACTIVIDAD HIDROPEROXIDASA DE LIPOXIGENASA EN MICELAS INVERSAS DE AOT/H2O/ISOOCTANO FUE ESTUDIADA UTILIZANDO NUEVAMENTE AMINOPIRINA COMO SUSTRATO DONADOR DE ELECTRONES. AL ANALIZAR EL EFECTO DEL TAMAÑO MICELAR O DE LA CONCENTRACION DE MICELAS SE OBTENIA UNA RESPUESTA ACAMPANADA SI EL ESTUDIO SE LL