Estudios estructura-función en subtilisimas hidrofobización con restos acilo y transformación en tiolsubtilisimas

Abstract

Se han llevado a cabo varios estudios estructura-funcion sobre un enzima hidrolitico de gran interes industrial: la subtilisina. En primer lugar, se pusieron a punto metodos de acilacion de la subtilisina con reactivos de distinta longitud de cadena. Se estudio el efecto de la hidrofobicidad en propiedades importantes del biocatalizador, tales como la estabilidad y la actividad catalitica, en reacciones de hidrolisis y sintesis (en concreto, la acilacion de la sacarosa). El segundo estudio estructura-funcion consistio en la obtencion de informacion estructural de las subtilisinas mediante un proceso indirecto: transformacion en tiolsubtilisinas y estudio de la reactividad con inhibidores especificos de cistein-proteasas. De esta manera se detecto una interaccion electrostatica en el centro activo de subtilisina bpn' no presente en carlsberg, entre el residuo asp-99 y his-64.