Invasión celular e inducción de apoptosis por Listeria monocytogenes

Resumen

Listeria monocytogenes es un cocobacilo Gram+, intracelular facultativo capaz de causar graves afecciones en individuos inmunosuprimidos, mujeres embarazadas y neonatos, luego de la ingesta de alimentos contaminados con este microorganismo. El primer sitio invadido por L. Monocytogenes es el intestino. Dependiendo de la respuesta inmune del huésped Listeria puede llegar y diseminarse por via sanguinea o linfatica a organos tan importantes como el hígado, bazo, cerebro y atravesar la placenta, produciendo graves afecciones tales como meningitis, encefalitis y abortos. El objetivo de esta tesis doctoral fue hacer estudios de invasión y multiplicación de la Listeria en líneas celulares que representan estos organos diana. Para ello utilizamos hepatocitos Hep-G2, células intestinales Caco-2, neuroblastomas N2A y neuronas adultas extraidas de los ganglios de raiz dorsal. Ensayando a su vez 4 cepas de L. Monocytogenes importantes por su capacidad para producir altas unidades de hemolisina (Listeriolisina O), mayor factor de virulencia de L.monocytogenes. Las 4 cepas escogidas (LO28, EGD-A, P14 y P14-A) presentaron niveles altos de invasión y citotoxicidad en los tres huespedes infectados, encontrando que en neuroblastomas N2A no solo tiene la capacidad de invadir el citoplasma celular sino también el núcleo. La mayor citotoxicidad producida sobretodo por las cepas EGD-A y P14-A, produjeron muerte celular por apoptosis en altos porcentajes en las tres líneas celulares usadas siendo menor en infecciones hechas con la cepa LO28 y P14, resultado demostrado morfológica, bioquímica y molecularmente. Concluyendo que la principal arma que usa este patogeno en la inducción de dicha muerte celular es la Listeriolisina O. Por otro lado L. Monocytogenes cepa P14-A tuvo la capacidad de penetrar a las neuronas adultas extraidas de ganglios de raiz dorsal a las 2 horas de infección, resultado confirmado mediante microscopia confocal.