Control de la multiinteracción proteina.soporte purificación, inmobilización y estabilización de enzimas industriales

Resumen

En la presente tesis doctoral se han desarrollado nuevas técnicas que permiten controlar el grado de interacción (número de enlaces formados) entre sólidos preactivados y cada molécula de enzima adsorbida o inmovilizada covalentemente sobre los mismos. Por un lado, la intensidad de estas interacciones se han intentado maximizar para conseguir aumentar la estabilidad de relevantes enzimas industriales: estabilización de enzimas monoméricas por unión covalente multipuntual (estabilización de enzimas por rigidificación) o estabilización de enzimas multiméricas por inmovilización multisubunidades (estabilización o proteínas multiméricas). Por otro lado, en otros casos la intensidad de las interacciones enzima-soporte se han intentado minimizar para diseñar nuevos soportes a medida para optimizar técnicas de purificación de enzimas por cromatografía de afinidad. Además, fruto de las investigaciones realizadas se han desarrollado nuevos métodos de inmovilización covalente de enzimas sobre soportes activados con grupos epóxido, nuevos soportes activados con grupos epóxido, nuevos soportes para la inmovilización no distorisonante y reversible de proteínas (soporte polietilinimina), nuevos soportes muy selectivos para cromatografía IMAC, etc.