Reconocimiento del origen de replicación del DNA del bacteriófago [theta]29

Resumen

1.El reconocimiento especifico del origen de replicación del DNA de O29 tiene lugar a través de una interacción entre la DNA polimerasa y a proteina terminal paterna. Esta interacción es necesaria para una iniciación y transición a la elongación eficientes. 2. No hay una secuencia nucleotidica especifica que sea reconocida como origen de replicación en O29, lo que confirma que lo que es reconocido como origen de replicación es la TP paterna. 3. El nucleótido 3¿-terminal del DNA de O29, aunque no actua como molde para la replicación, es necesario para una iniciación eficiente. Este requerimiento conformaría un mecanismo de seguridad destinado a impedir la fijación de mutaciones terminales en el DNA de O29. 4. La iniciación de la replicación está dirigida no sólo por el segundo nucleotido del molde sino tambien, y a un nivel significativo, por el tercero. Aunque en menor medida que el nucleotido terminal la mutación de uno de ellos afecta a la iniciacion dirigida por el otro. 5. La elongación del complejo de iniciación requiere un sliding-back previo, lo que implica una repitición terminal de dos nucleotidos. Origenes mutados que no permiten el sliding-back presentan una elongacion residual, bien directamente desde la segunda posicion, bien desde la tercera tras un jumping-back a la terminal. 6. La proteina p6 de O29 se une in vivo al DNA de O29, en ambos origenes de replicacion, en la region de control de la transcripcion tardia y en una region del gen 12. Este resultado esta de acuerdo con la hipotesis de que la proteina p6 organiza y empaqueta el genoma virico. 7. La afinidad de la proteina p6 in vivo por los extremos del DNA de O29 es superior a la observada por las dos secuencias internas indicadas en (6). Esto se podria relacionar con el hecho de que la replicación del DNA de O29, para lo cual p6 es imprescindible, comienza por los extremos de su DNA.