Purificación de una caseína kinasa II soluble y caracterización de dos actividades caseina kinasa I en "Dictyostelium discoideum"

Resumen

Se han identificado y caracterizado por primera vez en dictyos telium discoideum dos actividades tipo caseina kinasa i (cki-1 y cki-2) cuya diferencia principal es su sensibilidad a heparina. Tambien muestran un patron diferente de fosforilacion sobre caseina. Estas actividades estan presentes tanto en la fraccion soluble de la celula como en la particulada. En la fraccion soluble de d. Discoideum se ha purificado y caracterizado una caseina kinasa tipo ii con un peso molecular nativo de aproximadamente 150 kda. Mediante experimentos inmunologicos y de autofosforilacion, hemos podido determinar que el enzima esta constituido por una unica subunidad de 37 kda a la vez catalitica y reguladora, con capacidad de autofosforilarse. La actividad caseina kinasa ii purificada de la fraccion soluble se ha comparado con otra actividad caseina kinasa ii purificada de nucleos del mismo organismo, encontrandose gran similitud tanto a nivel estructural como bioquimico; quiza podemos resaltar como diferencia mas llamativa la distinta respuesta de la actividad de estos enzimas a la concentracion salina; mientras que el enzima soluble necesita sal para su actividad optima, la nuclear se inhibe a cualquier concentracion de sal. Existe homologia entre los determinantes antigenicos de las caseina kinasas ii de d. Discoideum y los de una caseina kinasa ii de mamifero lo que sugiere que se trata de un enzima muy conservado. Observamos cambios en actividad especifica de las kinasas tipo ii asociados a diferenciacion, lo que sugiere que estos enzimas pueden tener un papel importante en este organismo.