Interacción huésped-patógeno, movimiento y aplicaciones biotecnologícas de los rnas defectivos del virus del moteado del haba (bbmv)

Resumen

Las moléculas defectivas y defectivos interferentes han sido materia de estudio durante los últimos años, cuyo objetivo ha sido establecer los mecanismos de formación y el papel que estas partículas tienen en el control de la replicación viral. En este sentido, ha sido importante no solo analizar las interacciones y relaciones existentes entre estas moléculas, virus auxiliar y la planta huésped donde se replican, sino también el efecto de factores externos que pueden influir en la generación de éstas. En esta tesis, se han estudiado factores externos que influyen en la formación y acumulación de los D-RNAs del virus del moteado del haba (BBMV), virus del mosaico del bromo (BMV) y virus del moteado clorótico de la carilla (CCMV). Adicionalmente y con el fin de tener una mejor comprensión de la capacidad de infección y movimiento de las moléculas defectivas interferentes (DI-RNAs) del BBMV se ha utilizado el gen de la proteína verde fluorescente de la medusa (GFP) como gen delator. El cDNA de este gen, fue introducido reemplazando parte del cDNA genómico de la molécula defectiva interferente del BBMV. Finalmente se evaluó la capacidad de los RNAs defectivos de este virus para actuar como vectores en la expresión de proteínas. Los resultados obtenidos muestran que el tamaño de los DI-RNAs de BBMV formados está íntimamente ligado al huésped y las condiciones ambientales en las que se desarrollan las plantas. Por otra parte,los D-RNAs del BBMV y BMV no sólo se formaron y acumularon luego de sucesivos pases en alta multiplicidad de inóculo, sino también tras periodos prolongados de incubación en sus plantas huéspedes. Como factor externo, la temperatura afecta la formación de las moléculas defectivas. Temperaturas bajas favorecieron la formación y acumulación de los DI-RNAs de BBMV y los D-RNAs de BMV. CCMV no generó moléculas defectivas en carilla o Nicotiana benthamiana tras sucesivos pases de un in