El virus del mosaico del pepino análisis de la función de la proteina P3a y efecto de la expresión de secuencias derivadas de l gen 3a en la infección viral

Resumen

El virus del mosaico del pepino (cmv), miembro tipo del genero de los cucumovirus, posee un genoma constituido por tres moleculas de acido ribonucleico de sentido mensajero, denominadas rna 1, 2 y 3 en orden decreciente de tamaño. El rna 3, aunque dispensable para la replicacion de los rnas 1 y 2 en protoplastos es necesario para el establecimiento de una infeccion sistemica en la planta huesped. El rna 3 codifica dos proteinas, la proteina p3a en su extremo 5'-terminal y la proteina de la capsida viral en su extremo 3'-terminal. Con el fin de estudiar la funcionalidad de la proteina p3a y de desarrollar un sistema que permita analizar los dominios funcionales de dicha proteina, hemos analizado la capacidad de la proteina p3a de cmv-24 expresada en plantas transgenicas para complementar el movimiento defectivo de otra cepa de cmv. Esta capacidad es dependiente de la cantidad de la proteina p3a acumulada en las plantas transgenicas. Ademas, el movimiento del virus defectivo en la hoja inoculada sufre un retraso respecto al del virus silvestre, y su movimiento sistemico se encuentra alterado resultando en un patron atipico de invasion del virus en la planta transgenica y una atenuacion de los sintomas. Estos resultados indican que los procesos iniciales de la infeccion viral son determinantes para la sintomatologia y la invasion sistemica de las plantas. Ademas hemos abordado la posibilidad de obtener resistencia a la infeccion por cmv mediante la expresion en plantas transgenicas de secuencias derivadas del gen 3a. Para ello, se han construido diez mutaciones por delecion en la region central del gen 3a de cmv-24, y se ha analizado la susceptibilidad a la infeccion por el mismo virus en las plantas que expresan esas deleciones. Ninguna de las lineas de plantas transgenicas mostro una inhibicion de la acumulacion viral, si bien las lineas de las plantas transgenicas que expresaban dos mutaciones diferentes mostraron una dismi