Comparación de los efectos de la glucosa y la galactosa en Saccaromyces cerevisiae y búsqueda de supesores extrágenicos de mutaciones en los genes codificantes de la piruvato carboxilasa

Resumen

La glucosa produce en la levadura Saccharoomyces cerevisie diversos efectos, como la inducción o la represión de la transcripción de determinados genes y la activación o inactivación de diversas proteínas. En este trabajo hemos puesto de manifiesto que no sólo la glucosa es capaz de producir estos efectos, sino que la galactosa también produce efectos similares. Los mecanismos por los cuales se desencadenan todos los efectos mencionados no son bien conocidos, por tanto nos hemos propuesto la identificación de nuevos elementos involucrados en la señalización de la presencia de glucosa, de galactosa o de ambos azúcares. El abordaje que hemos seguido ha sido el aislamiento de supresores extragénicos de los efectos represores que la glucosa y la galactosa producen en una cepa que carece de los genes PYC1 y PYC2 (que codifican las isoenzimas de la piruvato carboxilasa). Una cepa pyc1 pyc2 no crece en azúcares en un medio con amonio como fuente de nitrógeno porque no es capaz de rellenar el ciclo de Krebs, debido por una parte a la carencia de actividad piruvato carboxilasa, y por otra a la represión que ejerce los azúcares sobre las enzimas del ciclo del glioxilato. Utilizando est cep como material de partida, hemos aislado una serie de mutantes que revierten este fenotipo. Uno de los mutantes caracterizados suprimía específicamente la represión por galactosa y resultó estar afectado en el gen GAL2, que codifica el transportador de este azúcar. Un transporte reducido de galactosa provoca una reducción del flujo glicolítico y un alivio de la represión catabólica que produce este azúcar. Por otro lado se han aislado dos mutantes ddrl-1 y DDR3-1, que suprimen la represión por glucosa, fructosa y galactosa. El mutante DDR3-1 crece más lentamente que la cepa silvestre en medios con glucosa o con galactosa, mientras que el mutante ddrl-1 lo hace a la misma velocidad. Ambos mutantes presentan una reducción del flujo gl