Estimulacion y regulacion de la formacion de cgmp dependiente de oxido nitrico en cultivos primarios de astrocitos

Resumen

Utilizando cultivos primarios enriquecidos en astroglia de la rata se ha demostrado que la estimulacion de la formacion de gmp ciclico (cgmp) dependiente de oxido nitrico (no) presenta variaciones regionales. De los distintos agonistas ensayados solo la noradrenalina (na) presenta efectos significativos en las cuatro regiones estudiadas (cerebelo mucho mayor que hipocampo igual a hipotalamo mayor que cortex) mientras que, el glutamato (glu) lo hace en hipocampo e hipotalamo. El ionoforo de calcio, compuesto a23187, mimetiza la respuesta de la na en cerebelo y del glu en las otras regiones. Estas diferencias no parecen ser debidas a diferencias en el nivel de expresion de la actividad guanilil ciclasa soluble (sgc) ya que la estimulacion directa de la sgc por un donador de no (snp) produce acumulaciones de cgmp muy superiores a las de los agonistas en todas las regiones estudiadas. En los astrocitos de cerebelo la formacion de cgmp dependiente de no tambien es estimulada por la activacion de los receptores de tipo ampa permeables al calcio. En estas celulas, los mismos estimulos que inducen la sintesis de no de forma dependiente de calcio, hacen disminuir el cgmp formado por estimulacion directa de la actividad sgc con donadores de no debido a la estimulacion de una actividad fosfodiesterasa dependiente de calcio-calmodulina (pde1). Tambien se ha estudiado el efecto de varios agentes capaces de regular la expresion de la nos-ii sobre la formacion de cgmp. Los resultados demuestran que el tratamiento de las celulas con dexametasona (dex), que bloquea la induccion de la nos-ii, potencia de 3 a 4 veces la estimulacion por na y por a23187 de la formacion de cgmp dependiente de no. Este efecto requiere transcripcion y sintesis de proteinas. El tratamiento con dex no induce la actividad sgc y tampoco la actividad nos-i que disminuye un 50%. Sin embargo, no se puede descartar que el efecto de la dex se deba a una disminucion de la ex