Contribución del fh y las proteínas FHRs del complemento en la predisposición y evolución del Síndrome Hemolítico-Urémico atípico y la nefropatía por IgA

Resumen

El Síndrome Hemolítico Urémico atípico (SHUa) y la Nefropatía por IgA (NIgA) son enfermedades renales con una importante morbilidad que frecuentemente conducen a insuficiencia renal terminal. Estas patologías están asociadas con la desregulación de la vía alternativa del Complemento, que puede ser consecuencia de la existencia de factores genéticos o de la generación de autoanticuerpos. Uno de los principales componentes implicados en estas patologías es el Factor H (FH), principal regulador de la vía alternativa. Existen varias proteínas homólogas de FH, denominadas “Factor H-Related Proteins” (FHRs) cuyos genes se encuentran adyacentes al gen del FH en una región denominada CFH-CFHRs. Se considera que las proteínas FHRs tienen una función antagónica a la del FH en la vía alternativa del Complemento, que podría verse afectada por sus concentraciones plasmáticas. Esta Tesis tiene como objetivo principal determinar los niveles plasmáticos de FH y FHRs en pacientes de SHUa y de NIgA, y analizar su posible asociación con polimorfismos en la región CFH-CFHRs. En la primera parte de esta Tesis se determinan los niveles de FH y proteínas FHRs en controles y pacientes mediante Western-blot y ensayos ELISA. Se observa que los pacientes tienen niveles más elevados que los controles, pero hay una gran variabilidad interindividual en los niveles de cada una de las proteínas, es decir, existen perfiles de expresión FH/FHRs muy diferentes. El análisis de estos perfiles muestra distinta distribución en controles y pacientes, e identifica algunos perfiles asociados con SHUa y NIgA. Además, estudiamos la influencia de los alelos de riesgo al SHUa CFHR3*B, CFHR1*B y CFHR4*B en los niveles de las proteínas FHR-3, FHR-1 y FHR-4A, y observamos que sólo el alelo CFHR3*B influye en los niveles, aumentando la expresión de FHR-3. La segunda parte, se centra en la caracterización genética e inmunológica de una cohorte de pacientes con Síndrome Hemolítico Urémico secundario a infecciones por Streptoccocus pneumoniae (SP-SHU). Comprobamos que los pacientes de SP-SHU pueden tener variantes raras en genes del Complemento, como ocurre en el SHUa primario, por lo que debería considerarse su inclusión en el cribado genético del Complemento. En los estudios inmunológicos de los pacientes SP-SHU observamos una desialilación transitoria de FH y proteínas FHRs por la neuraminidasa bacteriana. Tras analizar la relevancia funcional de la desialilación de FH mediante ensayos con proteínas purificadas, observamos que la eliminación de los ácidos siálicos de FH reduce aparentemente su capacidad para regular el Complemento sobre las superficies celulares, pudiendo ser éste un nuevo mecanismo patogénico en el desarrollo del SP-SHU.