Identificación de dianas efectoras de ANp73 asociadas a angiogénesis y linfangiogénesis. Valor diagnóstico y pronóstico en vesículas extracelulares en pacientes con cáncer colorrectal

Abstract

El cáncer colorrectal es el tumor con mayor incidencia en la población general de nuestro país y el segundo en mortalidad. La detección de este tipo de cáncer en etapas tempranas podría mejorar la supervivencia y pronóstico del paciente, sin embargo, las técnicas de cribado poblacional actuales presentan limitaciones en este propósito. En el origen del cáncer colorrectal tiene lugar la desactivación de diversos genes clave para las células y/o la activación de oncogenes por distintos eventos genéticos y epigenéticos. En este contexto tumoral, se ha demostrado que la isoforma oncogénica ΔNp73 está implicada en el proceso de carcinogénesis y progresión tumoral, además de asociarse a peor pronóstico en los pacientes con cáncer colorrectal. En esta tesis doctoral nos hemos centrado en estudiar e identificar las posibles dianas efectoras de la isoforma ΔNp73 y en qué procesos o actividades protumorales están implicadas. Para ello hemos llevado a cabo ensayos proteómicos basados en microarrays de anticuerpos y marcaje metabólico con isótopos estables junto con ensayos funcionales in vitro de ganancia y pérdida de función. Hemos identificado en el secretoma de células tumorales de cáncer colorrectal diversas proteínas desreguladas implicadas en adhesión celular, migración e invasión, metabolismo, unión y reparación del ADN, angiogénesis y linfangiogénesis. Aquí, validamos la implicación de BDNF y EMAP-II como mediadores del papel de ΔNp73 en angiogénesis y linfangiogénesis. Además, comprobamos que la desregulación de estos dos mediadores es independiente del estatus de p53. Asimismo, hemos mostrado que BDNF es un excelente candidato a biomarcador de diagnóstico precoz dada su presencia diferencial en el plasma sanguíneo de individuos con lesiones premalignas y pacientes con cáncer colorrectal. Por otro lado, hemos explorado el papel de las isoformas ΔNp73, TAp73 y Δ133p53 como biomarcadores de diagnóstico y pronóstico en biopsia líquida. Con este fin, se ha analizado el contenido de ARN mensajero de dichas isoformas en vesículas extracelulares de individuos sanos, con lesiones premalignas y pacientes con cáncer colorrectal. Hemos observado que las isoformas TAp73 no se empaquetan en vesículas extracelulares. Además, hemos encontrado que el contenido de ΔNp73 y Δ133p53 en vesículas extracelulares del plasma sanguíneo presenta potencial como biomarcador de diagnóstico precoz y pronóstico, respectivamente