Potencial terapéutico de linfocitos T reguladores de timo (thyTreg)vías de generación alternativas y modificación genética con un Receptor de Antígeno Quimérico Universal

Resumen

Las células T reguladoras (Treg) son una subpoblación de linfocitos T CD4+CD25+FOXP3+ con la capacidad de inhibir la respuesta inmunitaria y de regular la homeostasis. Gracias a estas propiedades, las Treg han cobrado una gran relevancia como posible tratamiento de enfermedades autoinmunes o frente al rechazo de trasplantes. Las estrategias empleadas hasta ahora han utilizado la sangre periférica como fuente de estas células, pero, debido a la escasa cantidad y/o a su fenotipo diferenciado, han demostrado una limitada eficacia. Gracias a un novedoso protocolo de obtención y expansión desarrollado por nuestro grupo, a partir del timo se consigue un producto celular indiferenciado y con una gran capacidad inmunosupresora: las thyTreg (1). Los objetivos de este estudio han sido: (I) Inducir células con idénticas propiedades a las thyTreg a partir de sus precursores, los timocitos. (II) Incrementar el potencial terapéutico de las thyTreg dotándolas de especificidad antigénica mediante receptores de antígeno quimérico (CAR). Para el primer objetivo, a los timocitos humanos CD25 negativos (CD25neg) se les indujo la expresión de un FOXP3 ectópico y/o fueron tratados con TGF-Beta 1 e IL-2, estrategias que previamente demostraron una alta eficacia induciendo Treg desde células otras T CD4+ de sangre periférica. A pesar de que estos elementos consiguieron inducir una alta expresión de los marcadores asociados con las thyTreg, el fenotipo transitorio, la heterogénea funcionalidad y la inestabilidad celular resultantes hacen en que, hasta ahora, no se puedan considerar a los timocitos CD25neg como una fuente alternativa de thyTreg (2). Por otro lado, para lograr el segundo objetivo, se modificaron genéticamente las thyTreg con tres CAR universales con un sistema de reconocimiento de múltiples dianas (UniCAR) (3). Los resultados mostraron que la diferente combinación de los dominios de co-estimulación de cada UniCAR modulaban diferentes perfiles de activación y funcionalidad en las thyTreg. Así, las thyTreg con un UniCAR, cuyo dominio de co-estimulación pertenece a la superfamilia de receptores del factor de necrosis tumoral receptor co-estimuladores de células T, redujeron específica y eficazmente la viabilidad, proliferación y estado de activación de las células diana. Además, también mostraron un efecto indirecto inhibiendo la proliferación y el estado de activación de las células no diana, pero sin afectar a su viabilidad. Por lo tanto, hemos generado células con una gran especificad de antígeno y con un elevado potencial inmunosupresor. De confirmarse su eficacia en modelos in vivo, estas thyTreg-UniCAR podrían suponer un versátil abordaje terapéutico frente a las enfermedades inflamatorias o autoinmunes, y para evitar el rechazo de órganos trasplantados. 1. Bernaldo-de-Quiros E, Cozar B, Lopez-Esteban R, Clemente M, GilJaurena JM, Pardo C, et al. A Novel GMP Protocol to Produce High-Quality Treg Cells From the Pediatric Thymic Tissue to Be Employed as Cellular Therapy. Front Immunol. 2022;13:893576. 2. Gallego-Valle J, Gil-Manso S, Pita A, Bernaldo-de-Quiros E, LopezEsteban R, Martinez-Bonet M, et al. Ectopic FOXP3 Expression in Combination with TGF-beta1 and IL-2 Stimulation Generates Limited Suppressive Function in Human Primary Activated Thymocytes Ex Vivo. Biomedicines. 2021;9(5). 3. Lohmueller JJ, Ham JD, Kvorjak M, Finn OJ. mSA2 affinity-enhanced biotin-binding CAR T cells for universal tumor targeting. Oncoimmunology. 2017;7(1):e1368604.