Activación y señalización del receptor del complemento CR3

Resumen

Las integrinas se sitúan en el centro de muchos procesos inmunológicos críticos como es la fagocitosis. Los Receptores del Complemento CR3 y CR4 están dotados con la habilidad de engullir y eliminar partículas opsonizadas con el complemento, y por tanto en la eliminación de patógenos, células apoptóticas y restos celulares. La investigación en el campo de la fagocitosis mediada por integrinas ha permitido dilucidar los eventos moleculares que controlan su activación y función efectora. La activación de estos receptores es dependiente de señales derivadas de otros receptores clave del sistema inmunitario (señalización inside-out), e involucra el reclutamiento crítico de Talina a las colas citoplasmáticas de la subunidad beta de las integrinas, en un proceso dependiente de Rap1-GTP y la unión de Talina a RIAM. En contraposición al proceso anterior, la señalización outside-in describe los eventos que se producen tras la activación de la integrina y han sido menos explorados. El siguiente proyecto de Tesis Doctoral explora el papel que ejercen proteínas del complejo de adhesión de integrinas en los procesos de fagocitosis y señalización outside-in mediante el uso de herramientas genéticas para alterar la expresión de proteínas que se sospechan críticas para el proceso en un modelo de línea celular promielocítica bien establecido. Un trabajo inicial disecciona la contribución de RIAM al proceso de fagocitosis y señalización outside-in. También se analiza el papel de VASP, un elongador de actina. VASP controla la internalización de la partícula y una expresión desregulada abroga este proceso debido a un citoesqueleto sobreactivado. Se identifica a RIAM como la responsable de controlar la reorganización del citoesqueleto, ya que es capaz de reclutar a VASP a la copa fagocítica. RIAM controla el estado de fosforilación de VASP, determinando su actividad. Por tanto, RIAM parece funcionar como un relé durante la fagocitosis, coordinando la activación de integrinas con la reorganización del citoesqueleto a través de VASP. Se analiza el requerimiento de expresión de proteínas próximas a las integrinas para la adquisición de un fenotipo fagocítico. La expresión de RIAM, VASP y Vinculina controlan de manera específica la expresión en superficie de las subunidades alfaM, alfaX y beta2. La deficiencia en estas proteínas previene el incremento de expresión de estas subunidades durante la diferenciación celular hacia neutrófilos, y parece ser determinante en la inducción de la transcripción del mRNA de estas subunidades, por tanto conectando la existencia de señalización funcional con regulación de la transcripción. Este efecto trancripcional estaba ligado al estado del citoesqueleto de actina, evidenciado por la renormalización de la expresión de integrinas con el uso de un compuesto promotor de la polimerización de actina, sugiriendo la participación de la vía de SRF. La inducción de la actividad transcripcional de SRF (Factor de Respuesta al Suero) requiere la translocación nuclear de su coactivador MRTF-A, el cual es secuestrado en el citoplasma por unirse a G-actina. Se observa que en células con deleción de la expresión de RIAM, VASP y Vinculina, MRTF-A se mantiene en el citosol, y por tanto no puede activar a SRF. Una localización inversa se observa para FHL-2 (correpresor de SRF), concentrándose en el núcleo y por tanto inhibiendo la transcripción mediada por SRF. La ausencia de expresión de RIAM, VASP y Vinculina parece controlar esta translocación nuclear, ya que en células parentales FHL-2 se encuentra localizado principalmente en la región cortical sub-membrana. Por tanto, el siguiente trabajo de investigación permite profundizar en el conocimiento de la función que desempeñan proteínas del complejo de adhesión de integrinas, tanto directamente sobre la fagocitosis como en la diferenciación mieloide y por tanto determinado la adquisición de un fenotipo fagocítico.