Neuronas motoras superiores corticoespinales, métodos y composiciones para diferenciar células madre neurales modulando la señalización del receptor de cannabinoides CB1 y usos de los mismos

Resumen

Método in vitro para obtener una neurona motora superior corticoespinal a partir de una célula madre neural, en el que dicho método comprende poner en contacto una célula madre neural en condiciones adecuadas para aumentar la señal mediada por el receptor de cannabinoides CB1 en dicha célula y en condiciones para fomentar la dorsalización de dicha célula y en el que las condiciones adecuadas para aumentar la señal mediada por el receptor de cannabinoides CB1 implican un aumento del número de células Ctip2+ Satb2- con respecto a los niveles basales de al menos el 5% e implican:

(i) poner en contacto dicha célula madre neural con un agonista del receptor de cannabinoides CB1 seleccionado del grupo que consiste en anandamida, 2-araquidonoilglicerol (2-AG), N-araquidonoil dopamina, araquidonil-2'-cloroetilamida (ACEA), HU-210, JWH-073, WIN 55,212-2, cannabinol, tetrahidrocannabinol (THC), 11-hidroxi-Δ9-tetrahidrocannabinol (11-OH-THC), levonantradol, dronabinol, AM-2201 (1-(5-fluoropentil)-3-(1-naftoil)indol), JWH-018 (1-pentil-3-(1-naftoil)indol), AM- 678, 2-araquidonil gliceril éter (2-AGE, éter de noladina), palmitoiletanolamida (PEA) y CP 55,940; y/o

(ii) introducir en dicha célula madre neural un vector de expresión que codifica el receptor de cannabinoides CB1 para aumentar la expresión del receptor de cannabinoides CB1 por encima de los niveles basales, y/o

(iii) introducir en dicha célula madre neural un vector de expresión que codifica una enzima de síntesis de endocannabinoides para aumentar en la célula la actividad de una enzima de síntesis de endocannabinoides por encima de los niveles basales, y/o

(iv) introducir en dicha célula madre neural un agente que silencia una enzima de degradación de endocannabinoides seleccionada del grupo que consiste en un ARNhc, un ARNip, un ácido nucleico antisentido y una ribozima y/o poner en contacto dicha célula madre neural con un inhibidor de dicha enzima de degradación de endocannabinoides, y

en el que las condiciones para fomentar la dorsalización de dicha célula implican poner en contacto dicha célula madre neural con un agente de dorsalización seleccionado de:

a) un inhibidor de Sonic hedgehog seleccionado del grupo que consiste en 3',5'-monofosfato cíclico, sal de sodio de N6,O2'-dibutiril-adenosina, AY 9944, KAAD-ciclopamina, ciclopamina, forskolina, GANT58, GANT61, JK184, HPI-1, HPI-3, jervina, SANT-1, GDC-0449, robotnikinina e IPI-926; y

b) un inhibidor de Smad seleccionado del grupo que consiste en nogina, dorsomorfina, SB431542, LDN- 193189, Lefty, activina, TGF-beta y combinaciones de los mismos.