Estudio de la influencia de diversos medios orgánicos en la actividad enzimática de nucleasas libres e inmovilizadas

Resum

La memoria recoge la aplicación de diferentes principios quimicofísicos, orgánicos y biotecnológicos al estudio de la influencia de diferentes medios orgánico-acuosos sobre la actividad catalítica de la nucleasa extracelular de s. aureus y la ribonucleasa a de páncreas bovino, actuando sobre los sustratos adn desnaturalizado térmicamente, trna y un nucleotido sintético (ptp). La memoria persigue como objetivo determinar las condiciones experimentales de máxima actividad hidrolítica de estos sistemas enzimaticos, y la insolubilizacion de ambas enzimas sobre un soporte orgánico del tipo polisacárido (en concreto, la agarosa), a fin de obtener unos sistemas experimentales útiles para la posterior reducción del contenido en ácidos nucleicos de concentrados proteínicos provenientes de organismos unicelulares (llamados scp sangle ceus proteins). Los resultados experimentales obtenidos muestran como es el medio orgánico al 2%(v-v) en dimetilsulfóxido el medio más adecuado para llevar a cabo la hidrólisis del dna; este hecho se atribuye a alteraciones del mismo signo y sentido producidas tanto en la nucleasa como en el dna por el medio; en cambio, por motivos similares es el medio al 2% en tetrahidrofurano el que permite obtener mejores resultados para la hidrólisis del rna por la ribonucleasa. Por lo que respecta a la insolubilizacion de estas enzinas, mientras para la ribonucleasa se obtienen derivados inactivos, con la nucleasa se obtienen unos derivados muy activos, estables hasta 50 grados c de temperatura, y fácilmente reutilizables.