Estudio de la activación de mecanismos de muerte celular programada inducida por el uso de resveratrol en un modelo de artritis inducida por antígeno (AIA)

Resumen

La artritis reumatoide (AR) es una de las enfermedades crónicas e inflamatorias más comunes del sistema musculoesquelético, capaz de producir un daño articular a largo plazo asociado con dolor severo, incapacitación funcional progresiva e incluso, la muerte temprana; además de los elevados costes socioeconómicos que ésta supone. Aunque la AR muestra con frecuencia una afectación sistémica, su principal diana son las articulaciones sinoviales. Así, la membrana sinovial hiperplásica es uno de sus principales rasgos patológicos, y se asocia tanto con la infiltración y retención local de células inmunes inflamatorias como con la activación y proliferación desmesurada de las células residentes de la sinovial. En relación a su tratamiento, los fármacos actuales presentan numerosas limitaciones, razón por la cual, en los últimos años, está suscitando gran interés el posible potencial terapéutico de los productos naturales frente a esta enfermedad. En esta línea, el presente trabajo tuvo por objetivo profundizar en el efecto profiláctico de un compuesto de origen natural, como es el resveratrol, en la AR, empleando para ello, un modelo animal en ratas de artritis inducida por antígeno (AIA). Para evaluar el efecto del resveratrol en el estudio in vivo, éste fue administrado oralmente durante los dos meses previos a la inducción de la artritis y continuando hasta el día del sacrificio, dos días después de la inducción, correspondiéndose con la fase aguda de la enfermedad. En primer lugar, se observó como el tratamiento con resveratrol fue capaz de contrarrestar los parámetros cardinales de la patología artrítica (proliferación de la capa íntima, infiltrado celular inmune y celularidad) en el tejido sinovial. Sumado a ello, se evaluó cómo la posible implicación de dos de los mecanismos de muerte celular de mayor relevancia, la muerte celular de tipo I o apoptosis y/o la muerte celular de tipo II o autofagia, podría ejercer un papel fundamental en el control de la proliferación celular desmedida del tejido sinovial de la articulación artrítica. Para ello, se analizó mediante técnicas inmunohistoquímicas la expresión sinovial de los marcadores caspasa-3 activa y su sustrato PARP como intermediarios del proceso apoptótico y LC3, p62 y beclin-1 como mediadores del proceso autofágico; evidenciándose como el resveratrol es capaz de regular el equilibrio entre la autofagia y la apoptosis, dirigiéndolo hacia la autofagia y potenciando, más concretamente, la vía no canónica de la autofagia. Así mismo, cada vez son más las evidencias que apuntan a que un fallo en la autofagia podría modular la actividad inflamatoria, favoreciendo de este modo el desarrollo de múltiples enfermedades inflamatorias y autoinmunes, como es la AR. De este modo, se evaluó mediante inmunoensayos la concentración sérica de tres importantes mediadores de la inflamación a nivel sistémico, con gran relevancia clínica: la interleuquina (IL)-1β, la prostaglandina (PG)E2 y la proteína C reactiva (CRP). Los resultados obtenidos mostraron como aquellos animales a los que se les administró el resveratrol de forma profiláctica presentaban unos niveles reducidos de estos marcadores; y del mismo modo, al llevar a cabo el análisis de correlación entre los niveles de éstos y la expresión sinovial de p62, se obtuvo en todos los casos una fuerte correlación positiva, evidenciando la importante relación que mantiene la autofagia con el proceso inflamatorio. Por último, se evaluó la expresión sinovial del factor de transcripción p65-NF-κB, clave en la regulación de la inflamación, y también de los marcadores VEGF y Ang-1, involucrados en el proceso de angiogénesis, lo que contribuyó a obtener una visión más amplia de las potenciales propiedades antiinflamatorias que posee el resveratrol en la patología artrítica. Nuestros datos mostraron que el resveratrol reguló a la baja los niveles de expresión de todas estas proteínas en el tejido sinovial de los animales a los que se les indujo la patología artrítica y, asimismo, nuestros resultados reflejaron la existencia de una fuerte correlación positiva entre la expresión sinovial de p62 y el factor p65-NF-κB. A raíz de estos datos, podemos sugerir que la supresión de la ruta inflamatoria, como consecuencia de la inhibición del factor de transcripción NF-ᴋB a través de la activación del proceso autofágico, podría considerarse como una estrategia terapéutica. La razón de esto se debe a que se inhiben multitud de mediadores inflamatorios que se encuentran involucrados en su vía de señalización y que participan activamente en los distintos eventos que subyacen a la AR. Para concluir, los datos aportados en este trabajo sugieren que la mejora del proceso autofágico podría considerarse como una potencial diana terapéutica en el tratamiento de la AR y, asimismo, apoya el empleo de compuestos de origen natural, como el resveratrol, como estrategia en el tratamiento de esta enfermedad