Aplicaciones de los dinucleótidos para el diagnóstico y el tratamiento del ojo seco.

Resumen

La presente tesis doctoral se ha llevado a cabo bajo un contexto de colaboración entre el grupo de investigación OCUPHARM de la Universidad Complutense de Madrid y la empresa spin-off Ocupharm Diagnostics S.L. con el objetivo de desarrollar nuevos productos sanitarios para el diagnóstico y el tratamiento del ojo seco en base a la investigación y el conocimiento en torno a los dinucleótidos que se ha generado durante las últimas dos décadas como consecuencia de dicha colaboración. En el primer capítulo experimental, se optimizó un modelo de ojo seco en conejos inducido por la instilación tópica de cloruro de benzalconio (BAC) al 0.2% para medir posteriormente la concentración de fosfato libre en la lágrima, además de evaluar el efecto de una lágrima artificial basada en un extracto de Artemia salina. Se demostró que la instilación tópica de BAC al 0.2% dos veces al día durante 5 días consecutivos deterioró algunos marcadores de ojo seco como la secreción lagrimal, el tiempo de rotura lagrimal, la tinción corneal, la hiperemia conjuntival, la densidad de células Goblet, la altura de la nube de mucina y los niveles de ARNm de IL-6 en las células conjuntivales. Por tanto, fue posible reducir el número de días de instilación de BAC al 0.2% necesarios para inducir un modelo de ojo seco en conejos en comparación con el modelo original, en el que se necesitaron 14 días de instilación de BAC al 0.1%. En el capítulo sobre las aplicaciones de los dinucleótidos para el diagnóstico del ojo seco, se cuantificó la concentración de fosfato libre en la lágrima de conejos con ojo seco inducido por la instilación tópica de BAC al 0.2% en comparación con conejos sanos. El fosfato libre de las muestras de lágrima se detectó y cuantificó con un kit comercial que contiene verde de malaquita y basa su medida en la proporcionalidad directa entre la concentración de fosfato libre y la absorbancia para una longitud de onda de 660 nm. Los conejos con ojo seco inducido mostraron un ligero aumento en la concentración de fosfato libre en comparación con los conejos sanos, aunque ambos grupos no mostraron diferencias estadísticamente significativas. Por lo tanto, estos resultados abren la posibilidad al desarrollo de un nuevo sistema diagnóstico del ojo seco, pero se hace necesario un estudio clínico en pacientes con ojo seco para confirmar los hallazgos encontrados. En relación con las aplicaciones de los dinucleótidos de los dinucleótidos para el tratamiento del ojo seco, se llevó a cabo en el primer capítulo el desarrollo preclínico de una lágrima artificial basada en un extracto de Artemia salina para su posterior evaluación en modelos animales de ojo seco y cicatrización corneal.