Utilización del elemento genético transponible Tn 10 para generar mutaciones por inserción en los genes aro de escherichia coli K-12. Implicaciones en la industria alimentaria

Abstract

El desarrollo de estrategias experimentales que permitan la utilización de funciones microbianas para disminuir la incidencia de toxiinfecciones alimentarias e incrementar los rendimientos en la producción de alimentos constituye un área de gran interés dentro de la higiene y tecnología de los alimentos. En este trabajo se han obtenido utilizando técnicas de ingeniería genética cepas de escherichia coli k-12 que pueden servir de base para la obtención de vacunas vivas frente a e. Coli enteropatogeno y a otras enterobacterias. Utilizando el elemento genético trasponible tn10 se han generado mutaciones por inserción en los genes aro que participan en la síntesis de los compuestos aromáticos. Una vez puesta a punto la metodología de transducción y de la selección e identificación de las mutaciones aro de interés se han identificado seis cepas de e. Coli k-12 con mutaciones en los genes aroa arob o aroe aroc yarod. De la cepa derivada de e. Coli k-12 denominada chs223 (aroa::tn10) y mediante una transducción generalizada con el bacteriófago p1vir se ha transferido esta mutación a la cepa de e. Coli enteropatógeno denominada e68. Una cepa derivada la e68-2d que posee un índice de reversión al fenotipo original aro+menor de 2x10-11 bacterias por generación se asume que posee las condiciones genéticas ideales para utilizarse como vacuna viva. Utilizando la metodología puesta a punto en este trabajo las mutaciones generadas en los genes aro de e. Coli k-12 pueden transferirse a cualquier cepa de e. Coli enteropatógeno de interés y se piensa que también a otras enterobacterias para que puedan actuar como vacunas vivas.