Diferenciación del lenguado (solea solea), solla (pleuronectes platessa), platija (platichthys flesus) y fletan negro (reinhardtius hippoglossoides) mediante técnicas genéticas e inmunológicas

Resumen

El objetivo de este trabajo es la diferenciación del lenguado (Solea solea), solla (Pleuronectes platessa), platija (Platichthys flesus) y fletán negro (Reinharditus hippoglossoides), mediante el empleo de marcadores moleculares específicos, inmunológicos y genéticos. Los marcadores genéticos seleccionados fueron los genes citocromo b, 12S ARNr y 5S ADNr. Con los genes citocromo b y 12S ARNr se amplificaron fragmentos génicos conservados mediante la reacción en cadena de la polimersas (PCR). La digestión enzimática de los fragmentos amplificados permitió diferenciar e identificar específicamente lenguado, solla, platija y fletán negro, mediante el análisis del polimorfismo en la conformaciónd e las cadenas sencillas de ADN (SSCP) de los amplicones del gencitocromo b, permitió diferenciar las cuatro especies estudiadas sin necesidad de realizar una restricción enzimática. Asimismo, utilizando el marcador genético 5S ADNr se amplificaron por PCR fragmentos de diferente longitud, cuyo análisis electroforético permitió identificar directamente las especies mencionadas. La diferenciación del lenguado, solla, platija y fletán negro mediante técnicas inmunológicas se consiguió utilizando anticuerpos policlonales obtenidso frente a las proteínas musculares solubles de lenguado (anti-PSL), solla (anti-PSS), platija (anti-PSP) y fletán negro (anti-PSF). Estos anticuerpos policlonales permitieron diferenciar inequívomente las especies citadas, utilizando dos formatos de técnicas inmunoenzimáticas (ELISA), en placas y en paletas.