Interacciones entre bacterias lácticas, células del epitelio intestinal y células del sistema inmunitario. Desarrollo de modelos in vitro

Resumen

La leche materna es el alimento ideal paralos recién nacidos ya que satisface todos su requerimientos nutritivos y les protege frente a infecciones. En el momento de iniciarse esta Tesis Doctoral, los pocos estudios existentes sobre la microbiología de la leche humana se restringían básicamente al aislamiento e identificación de bacterias potencialmente patógenas en bancos de leche y en casos de mastitis o infecciones neonatales. En consecuencia, se desconocía la composición microbiológica de la leche de mujeres sanas. Inicialmente se investigó si este fluido biológico contenía bacterias lácticas (BAL) y, de hecho, se pudieron aislar de leche, areola mamaria, piel del pecho, vagina y heces de ocho madres sanas y de la cavidad oral y heces de sus respectivos hijos. A continuación se seleccionaron al azar algunos aislados (178 de cada pareja madre-hijo) y se sometieron a un análisis de sus perfiles genéticos mediante la técnica RAPD. Posteriormente, se identificaron aquellos asilados que, independientemente de su origen, compartían perfiles idénticos. Los resultados revelaron que la leche materna es una fuente importante de BAL para el intestino neonatal y que las BAL presentes en la leche pueden tener un origen endógeno (el intestino materno). En este sentido, se estudió la posibilidad de que ciertas bacterias lácticas fuesen capaces de atravesar el epitelio intestinal mediante un mecanismo mediado por células dendríticas. Inicialmente se evaluó la capacidad de dos cepas aisladas de leche materna, Lactobacillus salivarius CECT5713 y Enterococcus faecium M1a, para provocar la activación de células dendrítcas inmaduras de origen murino (células D1). Para ello, se analizó la expresión de dos marcadores de activación (MHC-II y B7.2). Una vez comprobada la capacidad de activación de ambas cepas, se procedió a la realización de estudios de translación en modelos biocompartimentales tipo transwell utilizando células tipo-dend