Producción y empleo de anticuerpos de especificidad predeterminada para la detección, cuantificación y purificación de las bacteriocinas pediocina pa-1 y enterocina a y para el reconocimiento especifico de su (co)expresión heteróloga en lactococcus lactis

Résumé

Las bacteriocinas de las bacterias lácticas son atractivas para la industria alimentaria, ya que pueden emplearse como bioconservantes naturales y contribuir a la mejora de la c alidad microbiológica de los alimentos. En concreto, el uso de cepas bacteriocinogénicas y/o de sus bacteriocinas como bioconservantes alimentarios podría incrementarse en un futuro próximo, como resultado de la concienciación de los consumidores por los riesgos potenciales derivados no sólo de los microorganismo patógenos de trasmisión alimentaria, sino también de los conservantes químicos artificiales empleados habitualmente para contorlarlos. Tal aplicación de las bacteriocinas se vería notablemente facilitada por la disponibilidad de métodos eficaces para detectarlas. La generación de anticuerpos frente a las bacteriocinas puede proporcionar herramientas sensibles y específicas para la detección de las cepas productoras y para la cuntificación de las bacteriocinas en medios de cultivo y sustratos alimenticios mediante ensayos inmunoquímicos. Además, los anticuerpos puedenpermitir el dsarrollo de métodos alternativos de purificación de las bacteriocinas en un solo paso mediante la utilización de estrategias de inmunoafinidad. Sin embargo, la ausencia de preaprados comerciales que contengan bacteriocinas purificads, excepto en el caso de la nisina, para su empleo en protocolos de inmunización y la pobre inmunogenicidad de las bacteriocinas dificultan la generación de anticuerpos específicos. Estas circunstancias podrían explicar la escasez de publicaciones referenes a la generación de anticuerpos y de métodos inmunoquímicos apropiados existente en el árez de investigación en bacteriocinas. El uso de fragmentos sintetizados químicamente y deducidos de la secuencia aminoacídica de la bacteriocina de interés podría facilitar la obtención de anticuerpos de especificidad predeterminada para le reconocimiento específico de la